铜Ⅱ抑制Aβ肽聚集机理及纳米管状类—离子通道结构的分子模拟.docVIP

铜（）抑制Aβ肽聚集机理及纳米管状类—离子通道结构的分子模拟 【摘要】：日趋加快的人口老龄化步伐使以阿尔兹海默症(AlzheimersDisease，AD)为代表的神经退行性疾病成为世界范围内老年人健康的最大威胁之一。AD是发病率最高的神经退行性疾病，据不完全统计，仅2006年全球即新增患者约460万人。许多国家，特别是发达国家，面对老龄人口大幅增加、AD日渐流行的形势，已将其视为威胁公共健康和制约社会发展的重大战略问题而纳入了国家级研究计划。AD对人类健康的威胁与挑战引起了科学界的高度关注，目前已成为多学科攻关的热点课题。尽管早在1906年Alzheimer业已阐明AD的两大病理特征，老年斑(senileplaque，SP，亦称淀粉样斑)和神经纤维缠结(neurofibirilarytangle，NFT)，但是直至二十世纪八十年代中期，以SP的主要组分—淀粉样β肽(amyloid-βpeptide，Aβ)的发现为标志，AD的分子机理研究才进入了一个迅速发展的新时期。近十余年的研究表明，大脑皮层中Aβ斑和活性氧物种的积聚，可能都与金属-Aβ作用有关。金属-Aβ作用机理研究已成为AD分子机理的主流研究方向之一。大脑中Aβ肽的聚集是AD的一个关键性病理事件。体外研究表明，Aβ并不是自聚集的，某些外部因素，特别是金属离子是诱导Aβ聚集的重要神经化学因子之一。本文在大量实验研究的基础上，利用分子模拟方法，主要开展了以下三方面的工作：1、铜()抑制Aβ肽聚集机理的分子力学研究。体外实验发现，近生理浓度的Zn()即有很强的诱导Aβ聚集的能力。Cu()仅在微酸性条件下表现出聚集诱导效应；在宽广的pH区间(＞7.0)，特别是在生理pH(7.4)和适当的浓度比(Cu()／Aβ=4左右)条件下，对Aβ聚集表现出强烈的抑制效应，并且能够竞争性抑制Zn()的诱导效应。Cu()对Aβ聚集的抑制效应具有潜在的神经生理保护意义，为揭示金属代谢失衡与AD致病机理的关系提供了重要线索。另外，Cu()作为体内Zn()的潜在抑制剂也引起了人们的关注。本文首次通过分子模拟法研究了Cu()抑制Aβ聚集的机理。在水分子参与配位的单环模式中发现Y10残基有明显的促螺旋化作用，[Cu-H13(Nπ)-Y10(OH)]配合物形成了局部准3.0_(10)螺旋结构。在侧链协同的多环模式中发现Q15和E11残基侧链的协同配位使体系能量大幅降低，变构效应显著。配合物[Cu-3N-Q15(O)-E11(01)]和[Cu-H13(Nπ)-Y10(OH)]由于变构为准螺旋构象，极可能以可溶形式存在于溶液中。另外，发现氢键作用是Aβ聚集的主要驱动力。以上结果将有助于进一步加深对Cu()与AD致病机制之间关系的理解并制定相应的“抗淀粉样沉积”的治疗策略。2、铜()与Aβ肽键合机理的分子动力学模拟。研究表明，形成Cu()-Aβ可溶复合物是Cu()在一定条件下强烈抑制Aβ聚集的关键环节。Cu()的配位作用能使Aβ发生显著的构象转变，并形成具有稳定可溶构象的Cu()-Aβ复合物，从而实现对Aβ聚集的抑制。所以，研究Cu()-Aβ可溶复合物配位作用的动力学行为和构象转变机理对理解Aβ的性质、金属介入下的变构效应以及对Aβ聚集的影响具有重要意义。由于Aβ的高聚集倾向及其聚集体的难溶性，在原子水平上研究Cu()-Aβ可溶复合物的构象动力学行为是目前的实验手段所难以驾驭的。计算模拟因具有高时间分辨率和原子水平的表征优势而被本文应用于研究金属离子介入下AB的构象转变和聚集机理。通过分子动力学模拟，我们深入探讨了Cu()-Aβ可溶复合物配位作用的动力学行为和构象转变机理，建立了基于径向分布函数分析的评价多齿柔性配体中原子配位作用的Q函数法，探明了金属配位壳层构筑的详细过程，在原子水平上揭示了Cu()-Aβ可溶复合物的键合机理，阐明了Aβ主链原子的配位竞争效应、侧链原子的配位互斥效应和Cu()的模板效应等配位行为的动力学特征。从轨迹分析中发现，由金属配位几何刚性导致的金属模板效应，以及由刚性几何单元导致的配位原子间的配位互斥效应，是影响原子能否配位以及配位优先性的重要因素。通过构象分析，发现了以水为桥的配位键-氢键协同驱动的构象突变现象。本文结果为深入理解Cu()的聚集抑制效应提供了理论基础，为揭示金属代谢失衡与AD致病机理的关系和基于金属-Aβ作用机理的药物设计提供了有益线索。3、Aβ纳米管状类-离子通道结构的分子模拟。AD分子机理的离子通道假说认为，Aβ变构、组装成离子通道结构，嵌入膜双层，造成膜泄漏和钙稳态失衡，进而导致神经元的损伤和死亡。尽管越来越多的证据支持离子通道假说，然而，实验上迄今尚未得到Aβ通道的高分辨结构。在实验基础上，利用理论方法模建Aβ通道的结构模型，可以对Aβ通道的形成和离子通透机理进行