日本七鳃鳗血细胞显微结构及类淋巴细胞体外培养.PDFVIP

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日本七鳃鳗外周血细胞显微结构及类淋巴细胞体外培养 1,2 1 逄 越 , 李庆伟 (1. , 116029; 2. , 116622) 摘要: 以日本七鳃鳗(Lampetra japonica)为研究对象, 观察其外周血细胞显微结构和探讨类淋巴细胞原 代培养条件。采用 Wright 氏和 Giemsa 氏染色法对日本七鳃鳗外周血液有形成分进行显微观察, 可鉴 别出红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞; 未发现嗜碱性粒细胞。通过 Ficoll 密度梯度离心法和流式细胞仪分选获得高纯度的七鳃鳗类淋巴细胞。经条件优化后确定最适培养液 L15 + 20% FBS(5%七鳃鳗血清)+ 0.46% NaCl, 在 18℃, pH 6.8~7.0 的条件下对日本七鳃鳗类淋巴细胞 进行体外培养, 大多数类淋巴细胞半贴壁生长, 细胞状态较好, 最长可以存活近一个月。类淋巴细胞的 原代培养为日本七鳃鳗细胞体外培养的深入研究提供了实验依据。 关键词: 日本七鳃鳗(Lampetra japonica); 血细胞; 类淋巴细胞; 细胞培养 中图分类号: Q952, Q253 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2012)01-0023-07 (Lampetra japonica) Ficoll , 2009 , Cooper [7] , VLRA VLRB , , , , T B 2009 , , [1] , , , , , , , , 1 材料与方法 20 80 Fujii [2] 1.1 材料 1.1.1 [3] 1998 2009 12 , , 2000 Shintani [4] 7 d, PU.1/ Spi-B , PU.1/ 1.1.2 Spi-B ( 1.092) , ; Leibovitz’s L15 Sigma ;

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