提高PCR产物的几种效方法.PDFVIP

生物技术通报 ·技术与方法 ·　　　　　　　　　 2003 年第 2 期 BIO TECHNOL O G Y 　BULL ETIN 　　　　　　　　 提高 PCR 产物的几种有效方法 1 ,2 1 2 1 李爱丽 　姜涛 　马峙英 　贾继增 ( 1 中国农业科学院作物品种资源研究所 　农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室 ,北京 100081 ; 2 ) 　河北农业大学农学院 ,保定 071001 摘 　要 : 　结合作者的工作实际 ,着重介绍了有效提高 PCR 产物的几种方法 :如怎样高效快速地设计 PCR 引 物 ,怎样尽快确定 PCR 反应的最适退火温度 ,如何提高 GC 富集区的扩增效率等 ,为分子生物学工作者提供一些可 以借鉴的方法及经验 。 关键词 : 　聚合酶链式反应 　PCR 引物 　GC 富集区　梯度 PCR Several Methodologies on Improving the PCR Products Li Aili1 , 2 　Jiang Tao 1 　Ma Zhiying2 　Jia Jizeng1 ( 1 Key L aboratory of Crop Germplasm Resources and Biotechnology Mi nist ry of A gricult ure Instit ute of Crop Germplasm Resources Chi nese Academy of A gricult ural Sciences , Beiji n g 100081; 2A gricult ural U niversity of HeBei , Baodi ng 071001) Abstract : 　Combining the author ’s working experiences , we introduce here several methodologies on improving the PCR products , such as the disciplines which we should abide by when we design PCR primers ; how to determine the ap propriate annealing temperature of the PCR reaction ; how to improve the amplif ying efficiency of the GC rich region. We hope to provide some methodologies for those who do research in microbiology. Key words : 　Polymerase chain reaction 　PCR primer 　GC rich region 　Gradient PCR ( 　　聚合酶链式反应 polymerase chain reaction , 设计引物 ,先要把这条序列保存为. txt 文件 ,然后利 PCR) 最早由Mullis 于 1987 年发明 ,现已成为实验