清脑胶囊治疗血管性痴呆机制的研究.pdf

f I[[[I[11 I[II[Ir[I[UI 1 Y190780 清脑胶囊治疗血管性痴呆的机制研究 摘 要 目的：血管性痴呆(VD)指的是由脑血管病引起的有痴呆表现的临 床综合征。随着世界人口老龄化，VD发病率、致残率、病死率均有升高， 已成为威胁高龄人群健康的重要疾病之一，因此积极研究探索VD的发病 机制及其治疗有重要的医学价值和社会意义。中药清脑胶囊是依据中医药 理论，以活血化瘀，化痰开窍为治疗法则，结合多年临床用药经验研制而 成，临床用于VD治疗取得很好的疗效。为探讨清脑胶囊治疗VD的作 用机制，本实验采用VD小鼠模型及PCI2细胞缺氧模型，研究了清脑胶 囊对VD小鼠脑内单胺递质的含量及PCI2细胞缺氧损伤的影响，初步探 讨其治疗VD的疗效及可能的作用机制。 方法： 1清脑胶囊对VD小鼠脑内单胺递质的影响 采用反复缺血再灌注方法制备VD小鼠模型。选取造模成功的小鼠分 夹闭，尾部不放血)，每组10只(模型组死亡1只)，每日灌胃给药1次， 给药容量为0．2mL／1 09，连续给药4周，假手术组与模型对照组灌服纯水。 1．1学习记忆能力检测 水迷宫对各组小鼠的学习记忆能力进行测试：定位航行实验中计录并比较 各组小鼠逃避潜伏期、游泳路径的平均值、朝向角；空间搜索实验中计录 并比较穿越平台的次数、平台象限的游泳时间与总游泳时间的比值、平台 象限的游泳距离占总游泳距离的比值及朝向角。 1．2单胺递质检测 于第4周行为学测试完毕断头取脑，应用荧光分光光度法检测并比较 (5．HT)的含量。 中文摘要 对PCI2细胞缺氧损伤的影响 2．1清脑胶囊对PCI2细胞缺氧损伤的影响 2．1．1清脑胶囊对PCI2的细胞毒性检测 药物浓度梯度设定为l lxg．L～、1099．L～、10099．L～、50099．L一、 法测定各孔PCI2细胞的增殖活性，以OD值表示。 2．1．2清脑胶囊最佳作用浓度与作用时间的确定 清脑胶囊工作液作用浓度为如下浓度：1 00肛g．L一、 099．L～、5099．L～、1 24h；采用MTT法进行测定，确定药物抑制损伤的最佳作用浓度与作用 将对数生长期的PCI2细胞分为模型对照组、5099．L～、10099．L-1250卜tg．L。1 清脑胶囊组、无血清对照组。连二亚硫酸钠造模损伤16h后，观察各剂量 组细胞形态，采用MTT比色法、LDH活力测定法，比较各组对该模型的 影响。 2．2清脑胶囊含药血清对PCI2细胞缺氧损伤的影响 将对数生长期的PCI2细胞分为模型对照组、5％含药血清低、中、高 剂量组、空白血清对照组，共5组。连二亚硫酸钠造模损伤16h后，观察 各组细胞形态，采用MTT比色法、LDH活力测定法，比较含药血清各组 对该模型的保护作用。 结果： 1清脑胶囊对VD小鼠脑内单胺类递质的影响 1．1定位航行实验 与同一时间点的假手术组相比，模型组小鼠逃避潜伏期均显著延长 点的模型组相比，清脑胶囊中剂量组(6．89生药／kg)及清脑胶囊高剂量 指标均有改善趋势，但无统计学意义(PO．05)。 空间搜索实验：与同一时间点的假手术组相比，模型组穿越平台次数 中文摘要 显著减少(PO．01)，平台象限的游泳时间与总游泳时间的比值、平台象限 的游泳距离占总游泳距离的比值均显著减小(PO．01)，朝向角显著增大 P0．01)，平台象限的游泳时间与总游泳时间的比值、平台象限的游泳距 趋势，但无统计学意义(PO．05)。 1．2