CD147在Hlt;,2gt;Olt;,2gt;所致恶性黑色素瘤细胞氧化应激中的作用和机制研究.pdfVIP

摘要 目的 Melanoma，MM)A375细胞株； 细胞存活率和凋亡状态的影响； 制。 方法 A375细胞中，同时转染空白质粒作为对照，采用半定量RT-PCR法 和Westemblot法检测转染细胞中CDl47mRNA和蛋白的表达变化； 率，并选择适宜的作用浓度； (3) 后细胞存活抑制率的影响； 胞形态学变化的影响； 胞受氧化应激后细胞线粒体膜电位改变的影响； Index，AI)变化的影响； 化应激后细胞凋亡指数(Apoptotie 活性氧簇(reactive oxygen 的影响。 结果 和蛋白的表达水平显著降低，二条针对CDl47不同位点的siRNA的 稳定转染的恶性黑色素瘤细胞株，分别命名为C1和C2，用于开展下 蛋白的表达水平无明显变化(P0．05)，命名为A375．vector； 宜浓度进行后续实验； (3)3009M A375和A375．vector细胞间比较无明显差异(PO．05)； H202作用各组细胞24h后，细胞形态均发生了改 (4)3000M 表现为细胞稀疏和明显的胞浆皱缩； H202作用各组细胞12h后，细胞凋亡率均较处理 (5)3009M 较无明显差异(P0．05)； H202作用各组细胞3h后，细胞线粒体膜电位均有 (6)3009M 胞更为明显，而A375和A375．vector细胞间比较无明显差异； (7)3009MH202作用各组细胞3h后，细胞内ROS水平均有 Il 无明显差异(PO．05)； (8)3009M A375和A375．vector细胞间比较无明显差异(PO．05)。 结论 素瘤细胞株； (2) 进A375细胞存活率的下降、凋亡程度的上升； 胞抗氧化系统的破坏和增加细胞内ROS水平的增高进一步加重A375 细胞的氧化损伤。 关键词CDl47，siRNA，恶性黑色素瘤，H202，氧化应激 III ABSTRACT ective Obj establishtransfectedA375 melanomacell (1)To Stably malignant linewith 147siRNA； pSUPER／CD understandtheinfluencesofCD147on and (2)To viabilityapoptosis ofA375cellsunder oxidative H202-inducedstress； CD1 on A375cells themechanismsof 47 (3)Toidentify protecting from oxidativestress． H202一induced Methods recombinant 147siRNAwas (1)The plasmidpSUPER／CD stably transfectedintoA375 the ofthe ofCD147 cells，andchange expression mRNAand