倏逝波全光纤免疫传感器的开发及性能研究.pdfVIP

电子发烧友 电子技术论坛 第35卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 仪器装置与实验技术 第6期 2007年6月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 919一923 .~.口; ...; 口~… … : ‘ … … ， 仪器装置与实验技术 二-……，..……，..……，……砧 倏逝波全光纤免疫传感器的开发及性能研究 龙 峰’ 施汉昌 何苗 朱安娜 冯丽霞 (清华大学环境科学与工程系，环境模拟与污染控制国家重点联合实验室，北京100084) 摘 要 利用倏逝波与荧光免疫分析原理，研制了一种倏逝波全光纤免疫传感器。该系统利用单多模光纤祸 合器，使得激发光的传输、荧光的收集与传输均通过光纤来实现，减少了系统的光学分离元件，结构简单、紧 凑、可实现仪器小型化;同时该系统光传递效率高、损耗低、信噪比高;单多模光纤藕合器和探头之间采用可拆 卸的连接结构，可以实现多种样品的顺序检测。研究表明:光纤探头的最佳锥角度为0.37;系统对C卢.5荧 光染料的检测灵敏度可达到10一，mol/L;系统检测Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG的最低浓度为10wg/L，检测时 间为10min, 关键词 光纤免疫传感器，倏逝波，荧光检测，免疫反应 1 引 言 倏逝波光纤免疫传感器利用光波在光纤内以全反射方式传输时，在光纤探头所处的介质中产生倏 逝波。该倏逝波可以激发光纤探头表面连接的抗体或抗原分子上标记的荧光物质，同时结合免疫反应 原理，实现待测目标物质的定量检测1,〔23。通常倏逝波场的渗人深度只有数十纳米至几百纳米，所以倏 逝波免疫传感器只能探测到位于倏逝波场范围内的荧光分子发出的荧光，而溶液本体中游离的荧光分 子对检测结果几乎没有贡献[[33。这样不仅在检测过程中可以免除冲洗过程，同时可以减少溶液中的杂 质对检测结果的干扰。荧光免疫分析是将抗体抗原特异性识别的生物信号转换成敏感的荧光信号，具 有特异性强、灵敏度高、检测速度快、示踪物稳定、检测费用低廉等优点，在临床医学上一直发挥着重要 的作用。倏逝波光纤免疫传感器将倏逝波原理、荧光免疫分析原理及光纤检测优势结合于一体，可实现 灵敏、准确、快速和经济检测。因此，在环境监测、食品卫生检测及生物医学检测等领域具有广泛的应用 前景[4一吕]。 本研究开发的倏逝波全光纤免疫传感器利用单多模光纤藕合器结构，使得激发光的传输和荧光的 收集与传输都利用光纤来完成，并利用脉冲半导体激光器作为光源，省去了传统的倏逝波光纤免疫传感 器所需的常规光学系统(如斩光器、二色镜等)[，〕。因此，该系统光学分离元件少，结构简单、紧凑，可实 现仪器的小型化;光传递效率高、损耗低、仪器的信噪比高;同时，单多模光纤祸合器和探头之间采用可 拆卸的连接结构，可以实现多种样品的顺序检测。 2 仪器系统原理与结构 2.1 倏逝波光纤免疫传感器原理 当光束由光密介质(n2)进人光疏介质(n,)时，若人射角。大于临界角。。，人射光将全部反射回光 密介质(n2)中，称为全反射(totalinternalreflection,TIR)，其中。。定义为: 0,=sin一(‘n,/n2) (1) 式中:n,,n2分别为介质1和介质2的折射率，n2n,。在全反射的条件下，由于横向电场与横向磁场的 2006-10-08收稿;2007-01-23接受 本文系国家863计划(青年基金)资助项目(No.2002AA649160) *E一二 1;long04@.en 电子发烧友 电子技术论坛 分 析化 学 第35卷 Fresnel传递系数不为零，这表明虽然光能全部被反射。但电磁场却可从两种介质的界面延伸至n小的 介质中，