表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌诱导小鼠-中国农业科学.PDF

中国农业科学 2008,41(3):846-851 Scientia Agricultura Sinica 表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌 诱导小鼠产生特异性抗体 1,2 2 1 1 1 1 徐义刚 ，崔丽春 ，葛俊伟 ，唐丽杰 ，赵丽丽 ，李一经 1 2 （东北农业大学动物医学院，哈尔滨 150030 ； 东北林业大学研究生处，哈尔滨 150040 ） 摘要： 【目的】研究以干酪乳杆菌作为传递抗原活载体表达猪细小病毒主要免疫保护性抗原VP2 蛋白的免疫 特性。【方法】将构建的重组猪细小病毒（PPV）VP2基因的细胞表面表达型载体pPG-VP2电转化干酪乳杆菌 L.casei 393，获得阳性重组菌pPG-VP2/L.casei 393。重组菌以2%乳糖为诱导物，在MRS培养基中进行诱导，经SDS、 Western blot 及间接免疫荧光分析，目的蛋白获得表达。将重组菌及空质粒菌株分别口服接种 Balb/c 小鼠，收 集粪便及肠黏液样品测定小鼠产生抗 VP2 的特异性 sIgA，采集血液样品测定小鼠产生抗 VP2 的特异性 IgG，并对 获得的抗体进行PPV中和活性的测定。【结果】重组干酪乳杆菌pPG-VP2/L.casei393免疫小鼠能够产生明显的抗 PPV的sIgA 和 IgG抗体水平，其对PPV的中和效价分别为1 ﹕24和1 ﹕128。【结论】为PPV重组乳酸菌口服疫苗 的研制提供了重要的物质基础。 关键词：猪细小病毒；VP2蛋白；干酪乳杆菌；黏膜免疫 The Immune Response Induced in Mice Orally Immunized with Lactobacillus casei Expressing Porcine Parvovirus VP2 Protein 1,2 2 1 1 1 1 XU Yi-gang , CUI Li-chun , GE Jun-wei , TANG Li-jie , ZHAO Li-li , LI Yi-jing 1 ( Department of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Harbin 150030; 2Graduate School of Northeast Forestry University, Harbin 150040) Abstract: 【Objective 】Lactobacillus casei 393 was selected as oral vaccine carrier for the expression of porcine parvovirus (PPV) major immune protective antigen VP2 protein and immune character was analyzed. 【Method 】The constructed plasmid pPG-VP2 of cell-surface expression was electroporated into L.casei 393 generating recombinant pPG-VP2/L.casei393. The interest protein was detect