HIF-1α和VEGF在缺氧缺血胎鼠脑组织中表达的研究.pdf

＼黼 目 录 ～、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………·l 英文论著摘要……………………………………………………………………”3 二、英文缩略语………………………………………………………………………”6 三、论文 前‘占…………………………………………………………………………………………………………．7刖舌…………………………………………………………………………………………………………’7 材料与方法………………………………………………………………………·7 结果………………………………………………………………………………………………………”13 讨论………………………………………………………………………………………………………”19 结论………………………………………………………………………………………………………“19 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………20 五、参考文献…………………………………………………………………………2l 六、附录 综j丕………………………………………………………………………………………………………“24 在学期间科研成绩………………………………………………………………34 致谢………………………………………………………………………………………………………”35 个人简历…………………………………………………………………………36 ·中文论著摘要· …F-I Q及VEGF在缺氧缺血胎鼠脑组织中表达的研究 摘要 目的：利用宫内缺氧缺血性脑损伤动物模型，探讨脑损伤后不同复氧时间胎 a(HIF—l 鼠脑组织中缺氧诱导因子-I a)及血管内皮生长因子(VEGF)在mRNA和 蛋白水平的表达规律。 方法：将32只孕19天Wistar大鼠，按受孕先后顺序分为1个对照组及7个 实验组，每组4只。在水合氯醛麻醉下行开腹，暴露双侧子宫，对照组只暴露双 侧子宫15分钟，随即取胎鼠脑组织；实验组央闭子宫动脉15分钟，即建立宫内 缺氧缺血性脑损伤动物模型，分别于双侧子宫恢复血供后O、2、4、8、12、24及 48小时取胎鼠脑组织。应用HE染色光镜下进行病理观察，以确定动物模型是否 建立成功。应用Real-TimePCR方法检测HIF一1Q及VEGF的mRNA表达；应用免 疫组织化学法检测HIF-Ia及VEGF的蛋白表达定位。 结果：1．HE染色光镜下结果：对照组未见明显病理改变；实验组出现不同程 度的细胞体肿胀，细胞排列紊乱等病理改变，可见动物模型建立成功。2．Real-Time QmRNA PCR检测结果：对照组及各实验组均检测到HIF一1Q及VEGFmRNA。(1)HIF-I ±0．222，两组与12小时组比较，明显降低，与对照组比较无统计学意义。(2) VEGF 对照组比较无统计学意义。3．免疫组织化学法检测：(1)对照组HIF-1a蛋白几 乎不表达，实验组HIF—lQ蛋白主要在大脑皮层及海马等区神经元细胞的细胞核 及细胞浆中表达。VEGF在大脑皮层及海马等去神经元细胞的细胞浆中表达。(2) HIF—l 组与对照组比较无统计学意义；在8及12小时组的平均光密度值分别为0．3276 与12小时组比较，尸0．05，明显降低，与对照组比较无统计学意义。(3)VEGF 蛋白在对照组平均光密度值为0．2034±0．0053，在0、2及4小时组的平均光密 组比较无统计学意义；在8及12小时组的平均光密度值分别为0．2280±0．0093 比较，尸0．05，明显降低，与对照组比较无统计学意义。 结论：无论在mRNA水平还是在蛋白水平，HIF一1Q及VEGF在宫内缺氧缺血 性脑损伤的胎鼠脑组织中的表达随着复氧时间的延长均呈现先升高后降低的趋 势，于8小时明显升高，12小时达到高峰，24小时后降至正常水平。 关键词 HIF一1 Q，VEGF，胎鼠，缺氧缺血性脑损伤，动物模型