HuR及NF-kB蛋白在胃癌及其癌前病变组织中表达的关系及意义.pdf

IIII I I IIrlll1 1r1111111 II FllJIlllllll ＼1 目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………．．1 英文论著摘要……………………………………………．．5 二、英文缩略语………………………………………………10 三、论文 ‘前’言……………………………………………………11 刖舌……………………………………………………l上 材料与方法………………………………………………12 实验结果………………………………………………．．16 讨论……………………………………………………26 结论……………………………………………………29 四、本研究创新性的自我评价……………………………………30 五、参考文献………………………………………………．．3l 六、附录 综述……………………………………………………33 在学期间科研成绩…………………………………………47 致谢……………………………………………………48 个人简介………………………………………………．．49 ·中文论著摘要· HuR与NF—KB蛋白在胃癌及其癌前病变组织中表达 的关系及意义 目 的 检测一种重要mRNA结合蛋白家族Hu 人类各种组织广泛表达的成员HuR(ELAVLl)在正常胃黏膜、癌前病变及胃癌 组织中的表达及定位，分析HuR和NF．r,B在胃癌组织中表达的相关性，探讨HuR 与胃癌临床病理因素的关系以及两者在胃癌发生发展和预后中的作用及意义。 方法 临床病理资料及组织芯片制作：收集中国医科大学附属第一医院外科手术切 除胃癌组织237例，其中187例为同时收集距癌灶边缘大于5cm处正常胃黏膜作 为对照以及慢性萎缩性胃炎54例，肠上皮化生84例及异型增生25例。常规组织 蜡块行4Itm组织切片，常规HE染色，用于目标组织的定位。免疫组化染色及 (工作浓度为1：600)均购自美国Santa Cruze公司，PV9000免疫组化检测试剂盒 和氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒购自北京中杉生物有限公司。采用组织芯片制作 II 仪构建胃癌及癌前病变组织芯片蜡块，行4 m连续切片。采用柠檬酸修复液 (pH6．O)高温高压修复抗原，PBS替代一抗做阴性对照。结果判定方法：HuR蛋 白阳性反应为棕黄色颗粒定位于细胞浆和细胞核，NF．曲蛋白阳性反应为棕黄色 颗粒主要在细胞浆，少数在细胞核。每个病例由两位观察者采用盲法随机选择2 个高倍视野，计数200个细胞，染色强度(A)以阳性细胞呈色反应为准：无特 异性着色为0分，浅棕色为1分，棕黄色为2分，深棕色为3分：染色的阳性细 胞所占比例(B)按下列标准评定记分：阴性细胞或阳性细胞5％为O分，阳性 分，阳性细胞75％为4分。两种评分相乘(AXB)，将结果分为：O分为阴性(．)； 阴性，512分为阳性。 结 果 HuR蛋白在细胞浆中的表达从慢性萎缩性胃炎(8／54，14．8l％)、肠上皮化生 P0．05；HuR在肠上皮化生和异型增生与胃癌以及肠上皮化生与异型增生的阳 性表达比较未见显著统计学差异(尸O．05)。HuR蛋白在肠上皮化生(35／84， I+II(13／44， 29．55％)中的表达(尸0．05)。肿块的最大直径大于5cm组(60／95，63．16％)的 阳性表达率高于最大直径小于5 与患者的年龄、性别、Lauren分型、