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第三章基因工程
命题猜想+考题测试
考点一:DNA的粗提取及鉴定
考点二:DNA重组技术
考点三:基因工程的基本操作程序
考点四:基因工程的应用
考点五:蛋白质工程的原理和应用
考点一:DNA的粗提取及鉴定
1.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是(????)
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水
C.粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖等杂质
D.将粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂DNA被染成蓝色
2.在利用洋葱进行“DNA的粗提取和鉴定”的实验中,相关操作正确的是(????)
A.研磨洋葱时,加入适量的研磨液瓦解细胞膜,充分释放核DNA
B.利用定性滤纸进行过滤,以去除杂质,提高DNA的含量和纯度
C.向DNA滤液中加入等体积、预冷的50%酒精,以获得DNA粗提物
D.将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴,以利于发生颜色反应
3.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,下列相关叙述中,正确的是(????)
A.该实验的正确操作顺序是③→①→②→④→⑤
B.用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量相近
C.⑤表示要鉴定步骤①中所得到的白色丝状物主要成分为DNA,可使用二苯胺试剂来鉴定,沸水浴冷却后,出现蓝色的试管组别是对照组
D.步骤①的目的是初步分离DNA与蛋白质,析出并获得DNA;步骤④中在2mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度较大
4.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10g。剪碎后分成两组,一组置于20????℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。
(1)将DNA的粗提取物溶于2mol/L的NaCl溶液中,加入试剂,在条件下进行鉴定,结果如下表:
材料保存温度
花菜
辣椒
蒜黄
20℃
++
+
+++
-20℃
+++
++
++++
注:“+”越多表示蓝色越深。
(2)该探究性实验课题的名称可能是“探究不同材料和不同对DNA提取量的影响”。
(3)根据实验结果分析:
①结论1:与20℃相比,相同实验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量更(填“多”或“少”)。
结论2:等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从中提取的DNA量最多。
②针对结论1,请提出合理的解释:低温抑制了的活性,DNA降解速度减慢。
5.DNA粗提取和鉴定
【实验原理】
①DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在中的溶解度不同,在mol/L下,DNA的溶解度最小;同时DNA不溶于,但是细胞中的某些蛋白质可以溶解其中。
②DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:
【实验材料】
动物细胞选择(填“羊成熟的红细胞”或“鸡血细胞”),原因是
【实验步骤】
①破碎细胞:鸡血细胞液加入,同时用玻璃棒搅拌;切碎的洋葱中加入。然后收集滤液。
②去除滤液中的杂质:先在滤液中加入mol/L的NaCl,过滤除去不溶的杂质,再调节NaCl溶液的浓度至mol/L,析出DNA,过滤去除溶液中的杂质,最后用mol/L的NaCl溶解DNA。
③DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入的酒精溶液(体积分数为),静置2~3min。
④DNA的鉴定:用mol/L的NaCl溶解DNA;在条件下,DNA与反应呈现。
【注意事项】
①为防止血液凝固,需要向血液中加入。
②二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。
考点二:DNA重组技术
6.某细菌DNA分子上有4个Sau3AⅠ的酶切位点,经Sau3AⅠ处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用BamHⅠ处理,则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和BamHⅠ的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述不正确的是(????)
限制酶名称
识别序列及切割位点
BamHⅠ
G↓GATCC
Sau3AⅠ
↓GATC
A.上述两种限制酶切割后可形成相同的黏性末端
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