miR-148a的甲基化在胃癌发生中的意义的探究.pdf

·中文论著摘要· miR-148a的甲基化在胃癌发生中的意义的研究 目的 成RNA诱导沉默复合体，成熟miRNA的5’．非翻译区的2．7个核苷酸的“种子序 列”可以与靶mRNA的3’．非翻译区互补结合，在转录后水平上抑制靶基因的表 随后大量研究发现了至少500种这类小分子RNA，其中在人类染色体上就有300 余种。它在细胞的生长、增殖、发育和凋亡过程中发挥着重要作用，并与许多肿 瘤的发生、发展相关。MiRNA在肿瘤中发挥着相当于癌基因或抑癌基因的作用， 调节着肿瘤细胞的多种重要生物学行为。 胃癌是世界上常见的恶性肿瘤之一，尤其在中国、韩国及日本等亚洲国家。 它的发病是多因素、多步骤的复杂过程。目前发现很多miRNAs在胃癌中异常表 达。MiR-148a作为在胃癌中发现的其中一种miRNA，已证实在胃癌中存在异常 表达。DNA甲基化是指在D_NA双螺旋中，胞嘧啶核苷的嘧啶环第五位碳原子在 DNA甲基转移酶(DNA 酸(SAM)作为甲基供体而发生甲基化。研究发现在许多肿瘤中存在不同程度 的DNA异常甲基化现象。基因启动子区域cpG岛发生的异常甲基化可以使转录 沉默，导致某些抑癌基因表达下调，从而参与了肿瘤的形成和发展。MiRNA启 动子区域CpG岛的异常甲基化可能是肿瘤中的主要表观遗传学改变之一。越来 越多的研究表明，miR-148a启动子区CpG岛发生异常甲基化与胃癌有着非常密 ‘ 切的关系。 在本研究中，我们参考国内外相关文献及前期关于胃癌的miR-148a表达情 况的研究，确定其为我们的研究重点。利用亚硫酸盐处理后测序和甲基化特异性 PCR技术检测了胃癌及其癌旁组织miR-148b启动子区域CpG岛甲基化的情况。 通过与表达情况进行统计学分析，初步探索其在胃癌的发生中的作用。 方法 收集40对胃癌患者肿瘤及癌旁组织手术标本，经提取DNA后，运用亚硫 酸盐处理后测序和甲基化特异性PCR检测miR-148a在组织中的甲基化情况。 然后运用统计学方法分析miR．149a与表达之间的相关性。 结果 部分甲基化22例(55％)、非甲基化l例(2．5％)；40例相应癌旁组织中甲基化 13例(32．5％)、部分甲基化27例(67．5％)。胃癌组织与癌旁正常组织的甲基化 状态没有统计学差异(P=0．36)。卡方检验表明甲基化状态与表达没有统计学意 义(P=0．648)，线性趋势检验两者没有联系(P=0．36)。 ：耳j◆己结论 MiR-148a启动子区异常甲基化是一些肿瘤发生过程中的频繁事件，可能会 导致基因表达降低，促进癌症的形成。但在胃癌中miR-148a高甲基化的发生可 能不是造成其表达下调的机制。 ． 关键词 胃癌；甲基化；表达；miR-148a 2 ·英文论著摘要· roleof ofmiR-148a The promoterhypermethylation ● 』 ● ● ●· -● ■ _ ■ ■一 in CanCeranditsCfinical gaStrlC signilicance Objective aclassof 21-25nudeofides MicroRNA(miRNA)isendogenous,non-coding was in arewo皿scfibedas discoveredrecent RNA,which