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第 二 章核苷酸和核酸 Nucleotide and Nucleic Acid 第一节 引 言 一、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 二、如何证明核酸是遗传物质的载体？ １９４４年O.T.Avery的细菌转化实验是获得DNA携带遗传信息的第一个证明； １９５２年Alfred D.和Hershey等人建立的T2噬菌体捣碎的实验，这是第二个证据，证明噬菌体复制的物质是DNA而不是蛋白质外壳； 1953年 Watson和Crick的DNA双螺旋模型的发现，更进一步揭示了DNA作为遗传物质储存和信息传递的化学机制； 核酶的发现，一些核酸本身具有酶催化的活性。 98％核中（染色体中） 真核 线粒体（mDNA） 核外 叶绿体（ctDNA） DNA 拟核 原核 核外：质粒（plasmid） 病毒：DNA病毒 RNA主要存在于细胞质中 多聚核苷酸的结构特征 主链是相间出现的磷酸戊糖残基通过共价键连接； 各种碱基排在主链外侧； 磷酸二酯键在主链中取向相同从5’ 3’； 线性结构有3’和5’末端，即在3’位置上缺乏核苷酸残基，5’末端即在5’位置上缺乏核苷酸残基。3’端有游离的羟基，5’端有游离的磷酸基。 5. 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 课后思考？ 体内核苷酸只有5’的吗？脱氧核苷酸呢？ 环化核苷酸如何形成的？ 二、核酸的一级结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 碱基的性质影响核酸结构 大部分键具有共轭双键性质，因此有紫外吸收特性，最大吸收在260nm ； 碱基有疏水性，产生的碱基间的疏水堆积作用是稳定核酸空间结构的重要力； 碱基上的氮原子、羰基和环外氨基，形成氢键，维持DNA双螺旋的力； 碱基的性质影响核苷酸的解离程度：在pH3.5溶液中，UMP——GMP——CMP——AMP 摩尔磷消光系数：指含磷为１摩尔浓度的核酸溶液在２６０nm的吸光值。核酸分子太大，易断，不易得到大分子，因此用该方法来求核酸中核苷酸的量，磷量与核苷酸残基量相等，因此用磷的量来表示，摩尔浓度相等。?（p）260=A260/CL （C为磷摩尔浓度，L为比色杯直径cm,A260吸光度） 摩尔消光系数：指1摩尔浓度核酸溶液，在一定pH条件下某一波长的吸光值。 一、DNA的一级结构 （一）基本特征 脱氧核糖核酸的排列顺序 可以用碱基排列顺序表示 连接键：3’，5’-磷酸二酯键 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 碱基形成侧链 多核苷酸链均有5’-末端和3’-末端 DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 （二）、Chargaff定则 20世纪40年代末50年代初，美国生物化学家Erwin Chargaff（查盖夫）发现了DNA分子中的碱基组成规律，称为Chargaff规则。 不同物种间DNA碱基组成一般是不同的； 同一物种不同组织DNA样品碱基组成相同； 一个物种的DNA碱基组成不会因个体的年龄、营养状态和环境改变而改变； 任何一种DNA样品中，A的量=T的量，G的量=C的量 ，因此 A+G=C=T ，A+G+C+T=100%。 例如：G+C含量为40%，则G=20%、 C=20%、 A=30%、T=30% DNA的二级结构-双螺旋结构 DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 DNA双螺旋结构模型要点 DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 DNA的超螺旋结构 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 DNA的功能 DNA的双螺旋结构的意义 （四）、与DNA碱基顺序相关的特殊结构  提出课后复