液相色谱使用方法(花色苷).docVIP

摘要 ⑴、葡萄皮色素来源较为丰富。葡萄果皮花色苷不但含量高, 而且种类多, 葡萄花色苷作为一种天然食用色素, 安全、无毒，且具有降低肝脏及血清中脂肪含量、抗氧化、抗肿瘤、延迟血小板凝集等多种生理和药用活性功能对葡萄皮花色苷的提取技术及稳定性的研究具有重要意义目前为止花色苷的定量分析方法主要有直接比色法、pH示差法、亚硫酸脱色法、色谱法溶剂浸提法 微波辅助萃取法酶解法超高压辅助提取法利用微波萃取微波是一种频率300～300 000 MHz的电磁波。在微波场中吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到介电常数较小、微波吸收能力相对较弱的萃取剂中。由于传统提取过程中能量累积和渗透过程以无规则的方式发生，萃取的选择性较差，只能通过改变溶剂性质或延长溶剂萃取时间来获得，同时又受限于溶解能力和扩散系数，效果不够理想；微波因其能对萃取体系中不同组分进行选择加热，因而能使目标组分直接从基体分离萃取。微波萃取受溶剂亲和力的限制较小，可供选择的溶剂较多。另外，微波加热则利用分子极化或离子导电效应直接对物质进行加热，避免了传统加热过程因热传导、热辐射造成的热量损失，加热效率高、升温快速均匀，缩短了萃取时间。具有设备简单、适用范围广、重现性好、萃取效率高、萃取时间短、能耗低、污染轻等特点。、打开电脑，打开在线和离线 2、设置方法?“文件”中点击调用方法，设置参数???????????????（1）进样器???进样量20ul（2）流速1ml|min，溶剂A水B25%甲醇C乙腈D75%酸水（3）柱温30摄氏度（4）DAD检测器???选三种波长280250、520为适合花色苷的波长4、将方法保存后，打开在线文件，找出保存方法，启动泵。用D酸水100%排气泡?????、调用方法?????20-30min6、点击运行控制，核对样品信息，设置样品瓶位置，点击运行方法??30-35min、点数据分析???信号选项????复制-开始-程序-附件-写字板得出的谱图保存在固定文件夹中。、实验结束后用甲醇冲洗整个通道液相色谱测定花色苷（梯度） 用液相色谱分别检测葡萄酒及葡萄及的中含有的花色苷，在使用方法上与等度的一样，不同之处柱温：30℃、进样量20μL、流动相：B：25%甲醇；D：75%酸水0-20min；B：50%甲醇；D：50%酸水20-40min； B：75%甲醇；D：25%酸水40-60min；流速：1mL/min，关注波长：250nm、280nm、520nm，设置好后，保存方法。 结果与分析 等度葡萄酒 时间 峰面积 峰高 峰宽 峰面积% 1 6.536 451.6 20.2 0.3243 8.097 2 10.338 333.5 11.5 0.4553 5.979 3 14.974 288.8 6.8 0.5968 5.178 4 16.208 3550.9 68.2 0.8113 63.664 5 25.487 551.5 12.7 0.6682 9.888 6 35.182 401.3 6 0.9766 7.194 时间 峰面积 峰高 峰宽 峰面积% 1 5.969 215.3 1.8 1.4349 15.613 2 9.037 448.5 4.1 1.3007 32.527 3 12.327 173.4 3.9 0.6766 12.576 4 27.168 170.3 1.9 1.1646 12.350 5 29.246 184.4 2.5 1.0113 13.374 6 42.548 187 2.6 0.966 13.561 时间 峰面积 峰高 峰宽 峰面积% 1 6.634 639.9 22.1 0.3997 7.325 2 9.696 477.9 16.9 0.4122 5.470 3 13.21 4154.4 111.2 0.5478 47.552 4 17.471 668.5 31.8 0.3169 7.652 5 20.668 549.1 19.3 0.4077 6.285 6 29.108 1915.4 39.9 0.7277 21.925