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Martin[2明等在妊娠大鼠8--12天给予亚砷酸钠染毒，结果发现胎鼠出现脑露、脊
柱裂等畸形与PAX3基因表达星负相关。毛东伟叫等研究发现PAX3基因在糖尿
病小鼠NTDs胚胎中表达下降。
的接触区域广泛存在着一类称为间隙连接(gapjunction,G0的结构。GJ是位于相
邻细胞上的两个连接子偶合而成。每个连接子由6个相同的连接蛋白(conexin．Cx)
intercellular
亚单位构成，它们构成细胞闯缝隙连接通讯通道(gapjunctional
结构。每个基因被一个内含子分成一个小的非编码的上游外显子和较大的含有完
挂编码序列的外显予。CX基因的表达状态决定GYIC的形成、通讯通道的形态
结构和数量，也决定通讯通道消亡。缝隙连接的主要功能是为细胞问物质交流和
信息传递提供通道，在神经系统和循环系统尚未建立或未发育完善的早期胚胎，
长距离信息传递难以进行，胚胎各部分细胞的增殖、分化与生长发育离不开细胞
间化学信息的交换。因此Cx基因的表达状态与胚胎发育、细胞诱导、分化、生
长控制、细胞程序性死亡及衰老死亡等生物过程有着十分密切的关系。1984年
warneIl31】首次用实验证实了GJIC在早期胚胎发育中的重要作用，表明连接蛋白
基因可能在器官发育中起重要作用，可能是细胞生长调空和器官发育过程中某些
分化方面关键的侯选基因。E、Ⅳa水≈和Loe31对CX43与神经管缺陷进行进一步研
子代极易发生神经管畸形，而CX43基因敲除鼠转入CWM43后，子代发生畸形
明显降低，生存率明显升高。
1．2研究目的
通过研究砒石对小鼠致畸敏感期毒性来探讨砒石对小鼠的致畸作用，通过研
究砒石对小鼠胚胎PAX3及CX43基因表达的影响，进一步探讨砒石对小鼠致畸
的可能机制，为开发砒石治疗哮喘在临床应用提供理论依据。
1．3研究内容
(I)砒石对小鼠致畸敏感期的致畸作用。
(2)砒石对小鼠胚胎PAX3基因表达的影响。
(3)砒石对小鼠胚胎CX43基因表达的影响。
7
研究技术路线图
l小鼠受孕并给药
8
2材料与方法
2．1实验对象
清洁级昆明小鼠，由广东医学院动物中心提供，体重30_59，雌鼠为处女
鼠，雌：雄=200：100(只)。
2．2主要实验仪器
电子天平 AA-200
美国Denver
2S83．1型内切式组织匀浆器 浙西机械厂
台式高速冰冻离心机 德国I-IERAEUS
低温冰箱 美国California
752紫外分光光度计 上海第三分析仪器厂
水平电泳系统 美国Bio-Rad
微量加样枪 上海医科大学仪器厂
PCR扩增仪 美国PE公司9600型
Gel-Doe 美国Bio-Rad
1000成像定量分析仪
图像分析仪 德国Leiea
QS00IW
ws．800微波炉 中国格兰仕公司
LQP-B-4型颗粒制冰机
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