血吸虫疫苗疫苗探究现状及发展方向.docVIP

血吸虫疫苗疫苗探究现状及发展方向 　摘　要：血吸虫疫苗的研究工作已经进行了很长一段时间，发现了一批有价值的候选疫苗分子。同时通过改进和优化免疫途径，血吸虫疫苗的免疫保护力正在逐步提高。随着研究的日益深入，对血吸虫疫苗的免疫机制等了解更加透彻，距离研制出能诱导高的、稳定的免疫保护力的疫苗分子的目标将越来越近。 关键词：血吸虫； 疫苗； 保护力 血吸虫病的致病主要是由于虫体排出虫卵在机体内集聚从而诱发形成肉芽肿，最终导致肝硬化和肝腹水等[1]。通过动物实验和人群流行病学调查均表明哺乳动物在感染血吸虫后产生了一定程度的抗感染能力，对血吸虫的再次感染表现了出不同程度的抵抗力，表明血吸虫感染诱导宿主产生了一定程度的特异性免疫应答，同时显示出进行血吸虫疫苗研究的可行性和重要意义。 　　现阶段的血吸虫病疫苗主要分为分为虫源性疫苗、基因重组抗原疫苗、核酸疫苗、合成多肽抗原疫苗、抗独特型抗原疫苗以及混合疫苗等[2]。 1不同血吸虫疫苗的研制策略和效价评估 1.1虫源性疫苗 　　虫源性疫苗分为死疫苗、活疫苗两种，后者又可分为异种活疫苗与同种活疫苗。同种活疫苗根据致弱方式又分为包括射线和化学致弱疫苗。射线照射疫苗是制备同种活疫苗的常用方法，根据其获得致弱疫苗的方式，可以分为紫外线疫苗，x射线照射疫苗等。其中紫外线照射疫苗目前普遍采用的剂量为400?w/min.cm，吕芳丽等分别用25、50、150条和300条紫外线减毒日本血吸虫尾坳钻皮免疫或减毒童虫皮下注射免疫，分别诱导59.7%一77.2%和51.9%一71.4%的减虫率；以及63.6%—80.0%和57.4%—7.90%的肝组织减卵率[3]；x射线照射照射疫苗20kard为最佳照射量，动物实验表明其可以诱导较高的保护力。但由于虫体来源、对宿主的病理损害和安全性问题等原因，这些疫苗的应用均受到一定限制。 1.2基因重组抗原疫苗 　　基因重组抗原疫苗是运用基因工程方法，将分离出的具有保护力的抗原基因转入原核或真核系统使表达，将制备的保护性抗原制成疫苗。根据其抗原基因的编码产物性质，基因工程疫苗分成几大类，包括酶类分子，血吸虫肌球蛋白分子，膜类蛋白分子，钙相关蛋白分子，性别相关蛋白分子，信号蛋白分子和在血吸虫的生长发育过程中起重要作用的其它一些分子。 1.2.1 酶类分子 　　酶类分子抗原包括谷胱甘肽S-转移酶(glutathione-S-trans-ferase,GST)、钙激活中性蛋白激酶(calpain)、磷酸丙酮异构酶(triosephosphate isomerase, TPI)等。其中血吸虫GST是最有希望成为日本血吸虫病重组疫苗的候选分子之一。26GST和28GST是日本血吸虫的两种GST同工酶，具有解毒和抗氧化的作用。用rSj26kDaGST免疫水牛和羊，分别获得25%~62%的减虫率,和54%~60%的减卵率，而应用重组Sj26GST(reSjcGST)抗原免疫小鼠,可诱导产生18.2%、30.5%的减虫率和21.7%、 59%的减卵率。 1.2.2 副肌球蛋白分子 　　副肌球蛋白(paramyosin)是虫体发育过程中分泌并结合到虫体表面的一种糖蛋白，在虫体移行过程中作为靶抗原诱导保护性免疫 ，可与动物和人的Fc片段结抑制补体介导的免疫反应。通过构建pCMV-Sjc97 DNA疫苗免疫C57BL/6小鼠实验表明 其能在小鼠中诱导Th1型免疫应答，减虫率达36.3%，肝脏虫卵减少率42.4%[4]。同时，有实验显示Sjc97DNA疫苗具有一定的抑制或减轻血吸虫性肝纤维化的作用[。 1.2.3膜类蛋白分子 　　血吸虫虫体的表面抗原包括 Mr 23 000膜蛋白、Mr 29 000膜蛋白、Mr 20 000膜蛋白、Mr7 392膜蛋白、Mr 4 463膜蛋白、Mr 921膜蛋白、Mr16 000表面膜蛋白等，可以直接接触或致敏宿主，故而在免疫应答中可以作为靶标。林矫矫等应用重组抗原免疫小鼠获得的减虫率分别为57.80%-70.30%和52.63%-62.96%。Gan等用重组Sj23(reSjc23)抗原免疫小鼠,后得到45.5%的减虫率和58.4%的减卵率[5]。 1.2.4信号蛋白分子 　　信号转导是细胞完成其生理功能的基础，信号转导分子在生命活动中起到极其重要的作用，许多信号转导分子在多种细胞的信号通路中发挥着重要的作用。抑制其作用也就同时可以抑制血吸虫的各种生理活动的进行，所以正对该类分子的疫苗研制有其现实意义。目前，日本血吸虫信号转导蛋白14-3-3(Sj14-3-3)已被确认为血吸虫疫苗候选抗原，可以诱导产生抗血吸虫感染的部分保护力。Sj14-3-3DNA疫苗免疫BALB/c小鼠 获得的减虫率和减卵率分别为34.