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PCR的原理和应用-2011

PCR 的原理和应用 黄宝福 hoyear@ 枫岭生物 雅睿生物 b f 核酸 1868年,Friederich Miesescher 从脓细胞核中分离 出一碱性蛋白和含磷的有机酸的混合物,称之为核素 1928-1952年,证实遗传的物质基础是核酸 核酸(nucleic acid)是以核苷酸为基本组成单位的生 物大分子 核酸分类 脱氧核糖核酸(deoxyribonucliec acid,DNA) :细胞核和线粒体内,携带和 传递遗传信息,决定细胞和个体的基因型(genetype) 核酸 核糖核酸(ribonucliec acid, RNA) :细胞质和细胞核内,参与细胞内DNA 遗传信息的表达 病毒中,RNA也可作为遗传信息的载体 二.核酸的化学组成 DNA RNA 嘌呤碱 腺嘌呤 (A) 腺嘌呤(A) ( Purine bases ) 鸟嘌呤 (G) 鸟嘌呤(G)碱 基Base 嘧啶碱 胞嘧啶 (C) 胞嘧啶(C) Pyrimidine bases ) 胸腺嘧啶(T) 尿嘧啶(U) ( 戊糖(Pentose) D-2-脱氧核糖 D-核糖 酸(Acid) 磷酸 磷酸 用酸将DNA/RNA完全水解 DNA :含氮碱基、2-脱氧-D-核糖和磷酸 RNA :含氮碱基、D-核糖和磷酸 碱基 (base) 核苷 核酸酶 核酸 核苷酸 戊糖 (pentose) 磷酸 (phosphate) DNA 右手双螺旋模型要点 1. DNA分子由两条反向 的平行多核苷酸链围 3.4nm 绕同一中心轴构成的 双螺旋结构。双螺旋 表面形成大沟和小沟 2. 双螺旋直径2nm ,碱 基平面垂直于螺旋纵 轴 变性 :DNA变性是指双螺旋的DNA分子双链 解开形成单链的过程。由于双螺旋的稳定是靠 碱基堆砌力及氢键来维持,所以DNA变性是 不伴有共价键的断裂 引起DNA变性的因素有:加热、化学因素( 有机溶剂、酸、碱、尿素)和机械力 DNA分子的热变性 将DNA的稀盐溶液加

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