高迁移率族蛋白1在1型糖尿病鼠胰岛β细胞损伤中的影响机制.pdf

博士论文 中文摘要 高迁移率族蛋白1在1型糖尿病鼠胰岛13细胞损伤中的作 用机制 中文摘要 1 diabetes 1型糖尿病(type mellitus，T1DM)，又称胰岛素依赖型糖尿病或 青少年糖尿病，目前普遍的观点认为是免疫学因素、基因和环境等因素共同参与 了疾病的发生和发展的结果，其主要特点是细胞介导的胰岛13细胞的损伤。 box1， 上世纪七十年代初发现的高迁移率族蛋白1(high-mobilitygroup 促使一些调节蛋白复合物同DNA结合而发挥作用。此外，Ⅷ订GBl还参与了许 多与炎症及组织损伤有关的自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)及系统性红斑狼疮(systemiclupus of 重要的受体参与了HMGBl信号通路，包括toll样家族受体(toll—like family foradvanced end receptors，TLRs)及晚期糖基化终产物受体(thereceptor glycation factor-r,B， 1通过TLRs或RAGE活化核因子．rd3(nuclear products，RAGE)。HMGB NF．rd3)发挥作用，从而诱导促炎细胞因子的生成、白细胞粘附分子的上调、导 致组织损伤及炎症反应。 尽管胰岛Q细胞围绕在胰岛B细胞的外周并形成天然的物理屏障，然而在 T1DM的发病过程中，胰岛a细胞却几乎不受影响，而胰岛D细胞则明显受损。 非肥胖糖尿病(non．obese 疫性疾病的发病过程，T1DM也是一种自身免疫性疾病，然而，HMGBl是否参 与了T1DM的发病过程及其可能的作用机制，目前国内外尚未见报道。 本研究用免疫组化技术检测HMGBl在NOD小鼠胰腺中的分布后发现，在 参与了T1DM的发病过程。进一步检测NOD小鼠不同胰岛细胞表面HMGBl受 体的分布情况，证实了HMGBl可以同胰岛细胞表面的TLR4相互作用，且TLR4 主要表达于13细胞而非Q细胞。接着用基因表达谱芯片检测NOD小鼠糖尿病发 病过程中的基因变化。最后阐明HMGBl选择性损伤胰岛13细胞的TLR4信号通 路的作用机制。 第一部分 博士论文 中文摘要 细胞表面其相关受体的分布。 and eosin，脏)染色观察发病过程中胰岛的变化，胰岛素染色、激光共聚焦技 术检测未发病NODtJ、鼠和发病NODdx鼠胰岛免疫荧光染色结果，并统计胰岛数 目。HMGBl染色并用免疫组化检测HMGBl的多少与胰岛损伤轻重的关系。激 光共聚焦技术进一步检测NOD小鼠胰腺胰岛细胞不同细胞表面HMGBl受体的 表达情况。 30周的累积发病率为70％；HE染色镜下观察，未发病NODd、鼠胰腺内可见大小 不等的胰岛细胞，细胞呈团索状分布，胰岛结构完整，细胞饱满，细胞间有丰富 的毛细血管，胰岛内未见单核细胞或淋巴细胞浸润；发病小鼠胰岛变性、坏死消 失，胰岛体积变小、萎缩，胰岛内细胞数量较少，纤维组织增生及玻璃样变；(2) 免疫荧光激光共聚焦技术检测：未发病NODtJx鼠胰腺可见胰岛13细胞区域有大 量胰岛素阳性的红色荧光，胰岛结构完整、细胞饱满，红色荧光区域较广，而发 病NODdx鼠胰岛13细胞区域仅出现少量胰岛素阳性的红色荧光，较分散，且分 布区域较小：胰岛计数：未发病NODdx鼠胰岛数目较多，发病的N