免疫负调控基因在造血干细胞移植后移植物抗宿主病中的调控影响.pdfVIP

中文摘要 免疫负调控基因在造血干细胞移植后GVHD 中的调控作用 免疫负调控基因在造血干细胞移植后 移植物抗宿主病中的调控作用 中文摘要 目的初步研究免疫负调控基因 β-arrestin、Tim-3 及 SOCS-3 在异基因造血干细胞移 植（allo-HSCT ）后早期（即移植后 100 天内）的表达情况；探讨其在急性移植物抗 宿主病（aGVHD ）中的调控作用。 方法 选择2011 年03 月至2012 年01 月在苏州大学附属第一医院行异基因造血干细 胞移植的97 例患者作为研究对象：1）观察并收集其移植类型、aGVHD 的发生情况、 其它并发症、复发及生存情况。2 ）采集移植患者各时间点（移植后30 天、45 天、 60 天、90 天，发生aGVHD 时）的EDTA 抗凝外周血标本6ml，同时留取正常人的 标本作为基础表达水平，Ficoll 法分离出其中单个核细胞（PBMC ），抽提总RNA 并 逆转为cDNA，采用实时定量PCR 的方法，检测上述各免疫负调控基因mRNA 的相 对表达水平，研究移植后 100 天内各负调控基因在发生 aGVHD 的患者与未发生 aGVHD 的患者中的表达变化趋势；研究aGVHD 发生时各负调控基因表达量的变化， 以及不同移植类型移植患者中的表达情况。 结果1）无aGVHD 组和aGVHD 组比较，无aGVHD 组β-arrestin 基因表达在移植后 30 天较aGVHD 组明显偏低（P ﹤0.001 ），且低于正常水平（P ﹤0.001 ）；在45 天及 之后时间点各组患者β-arrestin 恢复至正常水平；aGVHD 组Tim-3 基因表达水平在 移植后90 天内均低于正常水平(P ﹤0.05),而无aGVHD 组Tim-3 表达水平一直保持 在正常水平附近（P ＞0.05 ）；SOCS-3 在无aGVHD 组移植后45 天时表达升高（P ＜ 0.05 ），60 天时恢复至移植前水平,aGVHD 组病人中SOCS-3 在45 天时升高更显著（P ＜0.01 ），且在90 天时仍未恢复至正常水平（P ＜0.05 ）。2 ）比较各基因在aGVHD 发 生时与同移植类型、同时间点未发生aGVHD 者的表达水平。β-arrestin、SOCS-3 的 表达水平较同时间点无aGVHD 患者显著升高（P ＜0.01），在aGVHD 好转后均呈下 降趋势；Tim-3 的表达则在aGVHD 时明显降低（P ＜0.05），且在整个aGVHD 过程 Ⅰ 免疫负调控基因在造血干细胞移植后GVHD 中的调控作用 中文摘要 中无升高趋势。3) 不同移植类型组间在移植后各时间点Tim-3 和SOCS3 表达水平有 差异（组间P 值﹤0.05 ）。其中，同胞移植组Tim-3 表达水平在移植后各时间点均较 脐血移植组明显偏高；在移植后45 天、60 天和90 天较单倍体移植组也明显偏高。 而同胞移植组的SOCS3 表达水平在移植后45 天和60 天较其他各移植组均明显偏低 （P 值﹤0.05，图10）,不同移植组间β-arrestin 的表达水平无明显差异（P ＞0.05） 结论 β-arrestin 在移植后 30 天的表达水平与 aGVHD 的发生有显著相关性，Tim-3 在移植后aGVHD 患者各时间点的表达水平均显著降低，SOCS3 在移植后45 天、60 天和90 天的表达水平升高与aGVHD 的发生有显著相关性。同胞全相合组与脐血移 植组和单倍体移植组间Tim-3 的表达水平存在差异，同胞全相合移植与其他移植类型 间SOCS3 的表达水平存在差异，β-arrestin 在不同移植类型间无显著表达差异。 关键词 异基因造血干细胞移植；移植物抗宿主病；Tim-3; SOCS; β-arrestin; 作 者：楚 潇 指导老师：吴德沛 教授