实时荧光定量RT-PCR检测外周血中Metadherin基因及及乳腺癌微转移的相关性研究.pdfVIP

与乳腺癌微转移的相关性研究 硕士生姓名： 李 兵 ’ 专旨导教师： 谢晓冬教授 指导小组： 刘兆掂 博士后 郑振东 主治医师 专业名称： 肿瘤学 摘 要 研究背景和目的：乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤及死因之一，全球 每年新增约120万乳腺癌患者，每年约25万人死于乳腺癌。近几年随着 生活方式的西化，我国乳腺癌的发病率有明显上升的趋势，在城市中乳 腺癌己成为女性最常见的肿瘤，仅次于肺癌，更重要的是乳腺癌的死亡 率在女性恶性肿瘤死亡率中居第一位，而转移是导致乳腺癌患者死亡的 最主要原因。目前认为术后发生转移的主要原因之一是术前未检出的微 tumor 小转移灶或循环肿瘤细胞(Circulatingcells，CTC)已进入血液，因此 寻找一种标志肿瘤早期转移的特异性指标，对早期发现处于亚临床阶段 的微转移癌具有重要的临床价值，为进一步探索乳腺癌发生侵袭转移的 相关机制、寻找新的治疗方法、提高乳腺癌的治疗效果、改善乳腺癌的 ElevatedGene·l 转移的重要基因，编码基因位于8q22，又称Astrocyte 化疗抵抗、肿瘤血管生成和衰老有关。本研究应用实时荧光定量RT-PCR 技术检测乳腺癌患者外周血中MTDH基因的表达水平，分析其与临床病 理特征之间的关系和临床意义，探讨MTDH基因是否可以作为乳腺癌预 后的预测指标。 方法： 1、应用离心柱法提取71例乳腺癌患者的外周血中总RNA， time 将其反转录为cDNA，以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real quantitative mRNA在乳腺癌患者中的表达情 RT-PCR)方法检测MTDH 比较，探讨其与乳腺癌预后指标和肿瘤增殖侵袭转移的关系；2、对部分 情况是否有变化；3、对入选的7l例乳腺癌患者进行治疗后的随访，研 究分析MTDH基因的表达与患者生存情况的相关性。 实体瘤患者外周血中均有一定量的表达，而在乳腺纤维瘤患者和健康志 愿者中未见阳性表达；2、在71例乳腺癌患者中有61例(81．3％)的患 MTDH基因高水平表达：3、乳腺癌患者外周血中MTDH基因的表达量 与淋巴结转移呈正相关，其中淋巴结转移组(1 3．227倍；4、乳腺癌患者外周血中MTDH基因的表达量在临床分期各组 期患者的4．563倍：5、乳腺癌患者外周血MTDH基因表达量与患者年 64、0．154、0．577， 龄、ER、PR及HER．2无关(P值分别为0．784、0．1 0)，而与这两个因子均有 子PCNA、Ki67无关(P值分别为0．093、0．1l 瘤侵袭转移过程中具有重要作用；7、经辅助化疗2～3周期后对部分 MTDH基因阳性的患者再次检测发现有14例患者的MTDH基因转为阴 性，转阴率60．9％(1 4／23)，说明化疗可以明显降低基因的表达水平。 结论：l、在乳腺癌、肺癌等实体瘤患者的外周血中检测出MTDH基 因时，提示循环肿瘤细胞进入血液，表明血中可能存在微小转移，因此 MTDH基因有望成为判定肿瘤早期转移的标志物；2、在乳腺癌患者外 周血中MTDH基因定量表达与与乳腺癌I临床病理特征的关系研究中发 现，MTDH基因定量表达与淋巴结转移情况和临床分期相关呈正相关， 而MTDH基因定量表达与患者生存时间呈负相关；3、辅助化疗前后乳 腺癌患者外周血中的MTDH基因的定量表达明显变化，并发现MTDH 基因高表达的乳腺癌病人其预后不佳，生存期较短。总之，乳腺癌患者 外周血中MTDH基