银杏外种皮中黄酮类物质的分离纯化及抗氧化活性的分析研究.pdfVIP

摘要 摘 要 银杏外种皮中黄酮类物质的分离纯化及活性研究 学科：工科 专业：食品科学 硕士研究生姓名：李思斯 指导教师：江波 教授 银杏树富含黄酮类物质，但是银杏各个部位所含的黄酮类物质的种类和含量 并不尽相同。目前对银杏的研究开发主要集中于银杏叶上，而对于银杏外种皮的 研究较少，影响了对银杏资源的充分开发利用。 本文主要探讨了银杏外种皮中的黄酮类物质的提取和纯化工艺条件的优化， 并在此基础上对其抗氧化活性进行了初步的研究。 通过使用乙醇溶液作为提取剂，考察了温度、乙醇体积分数、液固比、提取 时间以及提取次数对银杏外种皮总黄酮提取率的影响，并设计正交实验表进行实 验，确定最佳提取条件为：提取温度 70℃，乙醇体积分数 80%，液固比(v/w)25:1， 提取时间 2h ，回流提取 3 次。在此条件下，提取率为 91.01%，得率为 1.10%， 纯度为 10.38%。 采取萃取的方法进行脱脂实验。对比了四种有机溶剂的萃取效果，通过比较 脱脂率和黄酮损失率，确定环己烷为最适萃取剂。结合静态实验的吸附量、解吸 率、回收量、产品纯度的指标以及动力学曲线来看，最宜进行银杏外种皮总黄酮 的分离纯化动态实验的树脂型号为 ADS-17 。进行动态实验，得到银杏外种皮总 黄酮动态吸附洗脱最佳条件为：ADS-17 树脂柱径高比 1:10 ，样液浓度为 1.4mg/mL，上样 2BV ，pH值 4.0 ，吸附流速 3BV/h，洗脱剂为80%乙醇且用量 4BV ， 洗脱流速 1.5BV/h。经过分光光度法测定，此时黄酮纯度为53.1% 。 得到高效液相(HPLC) 法的最优条件：流动相为甲醇-0.1% 磷酸溶液 (v/v,60:40)，流速 1.0mL/min，检测波长 335nm 。并就此条件进行了精密性、重 现性、稳定性和回收率的检验。 通过对银杏外种皮总黄酮的还原力、清除 1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·) 能力、清除羟基自由基(·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O2¯·)能力、以及抗大 豆油氧化能力等的研究，测定了其抗氧化活性。当黄酮浓度为0.75mg/mL时，和 0.1mg/mL 的抗坏血酸的还原能力相当。在一定的实验方法条件下，银杏外种皮 总黄酮样品对自由基的清除能力大小排序为：DPPH· ＞·OH＞O ¯· 。加入黄酮的 2 大豆油氧化速率要远远小于空白大豆油氧化速率，表明银杏外种皮总黄酮具有一 定的抑制油脂氧化能力。 关键字：银杏外种皮，黄酮，脱脂，大孔树脂，抗氧化 i 摘要 Abstract Ginkgo biloba is rich in flavonoids. But the kind and quantity of flavonoids in different part of ginkgo biloba is different. Currently, researches on ginkgo biloba is mainly about the leaves, while there is still a shortage of studying ginkgo biloba exocarp, which leads to the inadequate utilization of ginkgo biloba resource. This paper studied the optimization of extraction and purification of ginkgo bi