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实验一、普通生物显微镜及使用
实验一、普通生物显微镜的使用(一) 动、植物细胞、真菌的观察及生物绘图法 一、实验目的: 1.了解普通光学显微镜和体视显微镜的基本构 造及功用,并正确掌握使用和维护方法。 2. 观察一些真核细胞的结构,学习基本生物绘 图方法。 3. 学习临时装片的制作方法。 二、实验原理: (一)、显微镜概述: 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。 (二)、显微镜的发明: 1. 最早由荷兰眼镜商在1600年前后制造的,它 的结构简单,放大倍数只有10~30倍,可以 观察一些小昆虫,如跳蚤等,因而有人称它 为“跳蚤镜”。 这种显微镜是用光线照明的,属于光学显微镜。 2. 英国物理学家罗伯特·虎克(Robert Hooke, 1635— 1703)研制出能够放大140倍的光学显微 镜,并用它来观察软木薄片,发现了细胞。 3. 1673年有个名叫列文.虎克(Antoni van Leeuwenhoek)的荷兰人用自己制造的显微镜观察到了被他称为“小动物”的微生物世界。他也被称为微生物的开山祖。 4. 1938年,德国工程师鲁斯卡( Ernest Ruska, 1906-1988) 制造出世界第一台透射电子显微镜 (TEM)。1952年,英国工程师Charles Oatley 制造出第一台扫描电子显微镜(SEM) (三)、显微镜的分辨率: 分辨率:也称为分辨力,它是指能把两个物点分 辨清楚的最小距离。 分辨率数值越高,分辨距离越大,则分辨率越低。反之亦然。所以,分辨率是以分辨距离来表示的。 其计算公式为: D=0.61入/N·A N·A·=n · sina/2 式中D为分辨率,A为光波波长,N·A·为物镜的数值孔径(镜口率)。 在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头 分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高。 各物镜的镜口率如下表: 物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm) 10× 0.25 5.40 40× 0.65 0.39 100× 1.30 0.11 显微镜的总放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数 公式为: M = K1 × K2 焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时,不 仅是这一物点,而且它的上下两侧也 能看清楚的厚度叫做焦点深度。 要看到标本的全厚度,必须调节螺旋 仔细地从上到下进行观察。 三、材料和仪器: 仪器:普通光学显微镜、体视镜(附显微用品: 擦镜纸、香柏油、二甲苯、载玻片、盖玻片) 材料与器材:新鲜酵母液、滴管、镊子、培养 皿、标本盒(内有各种装片) 四、实验步骤: (一)普通显微镜的使用及维护: I .光学显微镜的构造 普通生物显微镜由2部分构成: ①:光学部分:包括物镜、目镜、光源、聚光器,是显 微镜的主体。 ②:机械部分:包括镜筒、镜臂、镜座、镜台(载物台)、 调节旋钮、物镜转换器等,用于固定材 料和观察方便 。 II .显微镜的使用 1. 观察前的准备工作 ① .显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否 完整和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光 器上端透镜进行必要的清洁工作。然后进行调节。 ② .观察时要双眼同时睁开,一边观察一边进行记录 或描绘。 ③ .观察时所用的材料、药品和各种器具要预先备好 2. 使用方法: (1)低倍镜的使用:观察任何标本,均需从低倍镜 开始。 ① 检查:检查显微镜是否完好。 ② 准备:将显微镜放于前方略偏左,转动粗调旋钮 将载物台下降,旋转物镜转换器使低倍镜正对通 光孔。 ③ 对光: ④ 放标本片: ⑤ 调节焦距 ⑥计算放大倍数: 错误原因:如按上述操作,依然看不到图象,
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