实验一、普通生物显微镜及使用.ppt

实验一、普通生物显微镜的使用(一) 动、植物细胞、真菌的观察及生物绘图法 一、实验目的： 1.了解普通光学显微镜和体视显微镜的基本构 造及功用，并正确掌握使用和维护方法。 2. 观察一些真核细胞的结构，学习基本生物绘 图方法。 3. 学习临时装片的制作方法。 二、实验原理： （一）、显微镜概述： 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。 （二）、显微镜的发明： 1. 最早由荷兰眼镜商在1600年前后制造的，它 的结构简单，放大倍数只有10～30倍，可以 观察一些小昆虫，如跳蚤等，因而有人称它 为“跳蚤镜”。 这种显微镜是用光线照明的，属于光学显微镜。 2. 英国物理学家罗伯特·虎克（Robert Hooke， 1635— 1703）研制出能够放大140倍的光学显微 镜，并用它来观察软木薄片，发现了细胞。 3. 1673年有个名叫列文.虎克（Antoni van Leeuwenhoek）的荷兰人用自己制造的显微镜观察到了被他称为“小动物”的微生物世界。他也被称为微生物的开山祖。 4. 1938年，德国工程师鲁斯卡（ Ernest Ruska, 1906-1988) 制造出世界第一台透射电子显微镜 （TEM）。1952年，英国工程师Charles Oatley 制造出第一台扫描电子显微镜（SEM） （三）、显微镜的分辨率: 分辨率：也称为分辨力，它是指能把两个物点分 辨清楚的最小距离。 分辨率数值越高，分辨距离越大，则分辨率越低。反之亦然。所以，分辨率是以分辨距离来表示的。 其计算公式为: D=0.61入/N·A N·A·=n · sina/2 式中D为分辨率，A为光波波长，N·A·为物镜的数值孔径(镜口率)。 在物镜上，有镜口率(N.A.)的标志，它反应该镜头 分辨力的大小，其数字越大，表示分辨率越高。 各物镜的镜口率如下表： 物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm) 10× 0.25 5.40 40× 0.65 0.39 100× 1.30 0.11 显微镜的总放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数 公式为: M = K1 × K2 焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时，不 仅是这一物点，而且它的上下两侧也 能看清楚的厚度叫做焦点深度。 要看到标本的全厚度，必须调节螺旋 仔细地从上到下进行观察。 三、材料和仪器： 仪器：普通光学显微镜、体视镜（附显微用品： 擦镜纸、香柏油、二甲苯、载玻片、盖玻片） 材料与器材：新鲜酵母液、滴管、镊子、培养 皿、标本盒（内有各种装片） 四、实验步骤： （一）普通显微镜的使用及维护： I .光学显微镜的构造 普通生物显微镜由2部分构成： ①：光学部分：包括物镜、目镜、光源、聚光器，是显 微镜的主体。 ②：机械部分：包括镜筒、镜臂、镜座、镜台(载物台）、 调节旋钮、物镜转换器等，用于固定材 料和观察方便 。 II .显微镜的使用 1. 观察前的准备工作 ① .显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否 完整和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光 器上端透镜进行必要的清洁工作。然后进行调节。 ② .观察时要双眼同时睁开，一边观察一边进行记录 或描绘。 ③ .观察时所用的材料、药品和各种器具要预先备好 2. 使用方法： （1）低倍镜的使用：观察任何标本，均需从低倍镜 开始。 ① 检查：检查显微镜是否完好。 ② 准备：将显微镜放于前方略偏左，转动粗调旋钮 将载物台下降，旋转物镜转换器使低倍镜正对通 光孔。 ③ 对光： ④ 放标本片： ⑤ 调节焦距 ⑥计算放大倍数： 错误原因：如按上述操作，依然看不到图象，