噪声对特异性敲除外毛细胞Mylk基因小鼠听功能和形态学影响的初步研究.pdf

中文摘要 噪声对特异性敲除外毛细胞My脲基因小鼠 听功能及形态学影响的初步研究 东南大学医学院 研究生：宋大川 导师：高下 中文摘要 【背景】细胞骨架结构在声信号传递过程中起着重要的作用。许多噪声性聋病是 。 ’～由细胞骨架结构改变引起的。毛细胞骨架相关蛋白(以F．action为代表的一系列 细胞骨架相关蛋白)的表达在噪声暴露后维持外毛细胞结构的稳定，减轻外毛细 chainkinase) 胞的损伤中起到重要作用。肌球蛋白轻链激酶(MLCK，myosinlight 能够通过磷酸化II型肌球蛋白的轻链及与肌动球蛋白的交互作用来调节细胞骨 架。故而我们推断MLCK对噪声暴露所致的听力损伤也可能起到重要的保护作 用。 【方法】本研究中我们应用Cre／LoxP基因遗传突变系统建立了在耳蜗外毛细胞 (outerhair cell，OHC)特异性敲除gytk基因的小鼠。通过高声强噪声实验系 统建立噪声性聋实验动物模型，采用听觉电生理测试、耳蜗基底膜铺片、免疫荧 光、显微照相及图像分析等技术方法，定量研究实验动物听阈的变化、外毛细胞 缺失率。 【结果】成功建立-Jgyt足基因敲除组及对照组(CTR)小鼠；听性脑干反应检测 结果示：基因未敲除组和基因敲除组在无噪声暴露的条件下，听功能检测无明显 差异；基因敲除+噪声组和基因未敲除+噪声组于ld、10d后的ABR闽值较噪声暴 露前有明显提高，差异有统计学意义；基因敲除+噪声组在噪声暴露自{『后的阈移 较基因未敲除+噪声组高，差异有统计学意义；予耳蜗基底膜铀片荧光染色后发 现基因敲除+噪声组和撼因未敲除+噪声组中存在外毛细胞的凋亡、坏死和缺失的 细胞，其中基因敲除+噪声组的受损率较明显。 【结论】我们推断MLCK作为外毛细胞骨架的重要调节蛋白之一，对噪声性听力 中文摘要 损伤可能具有保护作用，敲除My腩基因后可增加对噪声性听力损伤的易感性。 【关键词】肌球蛋白轻链激酶；细胞骨架；外毛细胞；噪声性听力损失 英文摘要 Effectof ChainKinaseon MyosinLight ‘ ‘ l l ‘ 1 noise-incIuced hearing l ● 10SSln m0USe Abstract maintenanceof structureis foracoustic [Background]Thecytoskeletal important transduction．Noiseinduced casesalecausedthe hearingloss(NIHL)inmany by of structure．Mutationsof dysfunctioncytoske