发酵工程与设备复习题.doc

发酵工程与设备 1.怎么利用目标特性来分离发酵工程菌种？（14-15） 通过两种方法：（一）液体富集培养，（二）固体富集培养 （一）液体富集培养通常在摇瓶中进行。从环境中所取的样品中含有多种微生物，由于目标菌种的生长会改变培养基的条件，从而改变选择压力，使那些不需要的微生物不能生长。再将经过富集的培养物转接种到相同的新鲜培养基上，选择压力又重新确立。经过几次这样的转接培养后，将少量的富集培养液涂布到平板上。 （二）固体富集培养：固体培养基常用于一些酶产生菌的分离，这些技术通常包括选择性培养基，这种培养基含有这种酶的底物，酶作用底物后刺激产生菌的生长。或利用鉴别培养基原理或其他途径，把原先肉眼无法观察的生理性状或产量性状转化为可见的形态性状。 2.发酵工程菌株的选育及改造有哪几种方法？（18-20） 诱变育种 诱变育种是利用物理或化学等诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群，使其突变率大幅度提高，然后采用简便、快速和高效的筛选方法，从中挑选出少量符合育种目的的突变株，以供生产实践和科研用。 二、杂交育种 杂交育种是指两个基因型不同的菌株通过接合，使遗传物质重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株。一般是指人为利用真核微生物的有性或准性生殖，或原核微生物的接合、F因子转导、转化等过程，促使两个具有不同遗传性状的菌株发生基因重组，获得优良的生产菌株。 三、原生质体融合 是指先用酶分别酶解两个出发菌株的细胞壁，在高渗环境中释放出原生质，将它们混合，在助融剂或电场的作用下，使它们互相融合，促使两套基因组之间的接触、交换、遗传重组，在适宜的条件下使细胞壁再生，在再生的细胞中获得重组体。 四、基因工程育种 是运用体外DNA各种操作或修改手法获得目的基因，再借助于病毒、细菌质粒或其他载体，将目的基因转移至新的宿主细胞并使其在新的宿主细胞系统内进行复制和表达，或者通过细胞间的相互作用，使一个细胞的优秀性状经其遗传物质的交换而转移给另一个细胞的方法。 3.什么是营养缺陷性？什么是代谢的反馈调节机制？（21） 营养缺陷性：指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的合成培养基中增殖，必须补充一种或二种以上的营养物质才能生长。 代谢的反馈调节机制： 反馈抑制：是生物化学途径的末端产物抑制反应途径中某个催化酶的活性（通常是第一个反应）的现象。 反馈阻遏：是生物化学途径的末端产物阻止反应途径中某个催化酶的合成。 4.怎样选育代谢调节突变株 1、细胞膜渗透性的改造 通过生物素水平的调节，改变其细胞膜渗透性。 2、不能产生反馈抑制或阻遏的突变株的筛选 利用营养缺陷型突变株可以获得高浓度的产物，这类菌株可以通过降低或消除末端产物浓度，在代谢控制中解除反馈抑制或阻遏，而使代谢途径中间产物或分支合成途径中末端产物积累。 干热灭菌法 是指在干燥高温条件下，将微生物杀死。干热对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩引起中毒的作用，其中氧化作用是主要的。干热灭菌必须高温，工业生产中采用的条件是摄氏160℃，1h。主要使用于需要保持干燥的器械、容器的灭菌。 湿热灭菌 是借助蒸汽释放的热能和水的参与，能使微生物细胞中蛋白质、酶、核酸分子内部的化学键（特别是氢键）受破坏，特别是蛋白质发生不可逆的凝固性变性，使微生物死亡。蒸汽在冷凝时释放出大量潜热，具有强大的穿透力，尤其适用于大量培养基及发酵设备的灭菌。 化学药品灭菌法 一些化学药品易与微生物细胞中的某种成分产生化学反应，如使蛋白质变性、酶类失活，破坏细胞膜透性而杀死微生物。根据灭菌对象不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态熏蒸等。 10.现代的糖化工艺由哪几种设备完成?共有什么特点和作用？ 现代糖化基本都采用五器组合，即糊化锅、糖化锅、过滤槽、煮沸锅和回旋沉淀槽 （一）糊化锅 糊化锅是用来加热煮沸辅助原料（一般为大米粉或玉米粉）和部分麦芽粉醪液，使其淀粉液化和糊化。 （二）糖化锅 啤酒糖化锅的用途是使麦芽粉与水混合，并保持在一定的温度下进行蛋白质分解和淀粉糖化。 （三）麦汁煮沸锅 麦汁煮沸锅又称煮沸锅或浓缩锅，用于麦汁的煮沸和浓缩，并加入酒花，浸出酒花中的苦味及芳香物质。还有加热凝固蛋白质、灭菌、灭酶的作用。 （四）糖化醪过滤槽 糖化醪过滤槽是啤酒厂获得澄清麦汁的一个关键设备。国内糖化醪过滤主要是平底筛过滤槽。此外还有一种快速过滤器。 13.空气除菌有哪几种方法？原理是什么？（92-93） （一）辐射灭菌 高能射线（X射线、α射线、β射线、γ射线、紫外线、高能阴极射线）、超声波等从都能破坏蛋白质等生物活性物质，从而起到杀菌作用。 （二）热灭菌 利用空气被压缩时所产生的热量进行部分杀菌，能够减少过滤器的过滤负荷。 （三）静电除菌 静电引力吸附