兽药残留SPE方法.doc

The determination of antibiotic and pesticide residues in foods： sample preparation for LC-MS analysis Abstract: In this article, we will discuss SPE strategies prior to tandem LC/MS analysis for sub-ppb determination of chloramphenicol, nitrofuran antibiotic metabolites, and other related substances in animal tissues and in honey. Sample preparation for LC-MS analysis to determinate of antibiotic and pesticide residues in foods is reviewed and prospected . Key words: antibiotic and pesticide residues , food , sample preparation , LC-MS 食品中抗生素和农药残留分析：用于LC－MS分析的SPE样品前处理方法 Waters公司 赵维国 摘要：本文将讨论LC-MS分析之前，动物组织和蜂蜜中残留物质的样品前处理策略，其中包括ppb级氯霉素、喹诺酮类、硝基呋喃代谢产物和其它相关物质的固相提取（SPE）方法。对食品中抗生素和农药残留的LC－MS分析的SPE样品前处理方法进行综述和展望。 关键词：抗生素和农药残留，食品，样品前处理，LC-MS 食品中抗生素和其它兽药残留目前正在全球范围内受到广泛的重视。对于农药和兽药残留的分析而言，所需达到的要求通常取决于毒理学评估的结果，而所期望达到的定量限(LOQ)与合法注册的农业化学品的最大允许残留限量相关。近年来更加令人担心的是畜牧业和渔业生产中违规非法使用的某些抗生素残留。这些抗生素没有允许的残留限量，任何被禁用抗生素的存在皆可作为犯罪活动的证据。本文将讨论串联LC-MS分析之前动物组织和蜂蜜中残留物质的SPE样品前处理策略，其中包括ppb级氯霉素、氟喹诺酮类、硝基呋喃代谢产物和其它相关物质的SPE提取方法。对食品中抗生素和农药残留的LC－MS分析的SPE样品前处理方法进行了综述和展望。 固相提取方法 SPE的优势 SPE是样品前处理的重要手段。与液液萃取相比，SPE方法简单、快速、重现性好且比较容易实现自动化，是近年来应用非常广泛的样品前处理技术之一。SPE技术能够有效地净化和浓缩样品，不仅提高检测灵敏度，延长色谱柱寿命，而且能够延长LC-MS系统珍贵的开机时间。 SPE吸附剂：Oasis吸附剂的选择 Oasis吸附剂是Waters公司1996年起推出的SPE产品，是Waters继其在业界首推Sep-Pak固相提取产品后，又一个划时代的SPE品牌。Oasis吸附剂目前有反相机理(HLB)、阳离子交换与反相混合机理(MCX)、阴离子交换与反相混合机理(MAX)、弱阳离子交换与反相混合机理(WCX)、弱阴离子交换与反相混合机理(WCX)五种类型，分别适合于多种未知有机物及碱性、酸性物质的提取?(参见图1：Oasis吸附剂选择图)。 图1 Oasis吸附剂选择图 用于LC-MS分析的SPE方法开发示例 2.1 牛肉中氟喹诺酮类(Fluoroquinolone)药物的SPE方法开发 氟喹诺酮类药物主要用于预防和治疗动物疾病[1，2]，少量使用对动物生长有一定的促进作用。但是过量使用或使用不当会造成这类药物在畜产品中的长期残留。而这类残留的药物对人的中枢神经系统会造成不良影响[3]，因此，欧盟、北美等国家规定：氟喹诺酮类药物在动物源性食品中的最高限量不得超过10~400μg/kg。 表1 喹诺酮类药物的最大残留限量(MRL) [7] 残留标记物 动物种类 目标组织 MRL(μg/kg) 达诺沙星（Danofloxacin） 牛（Bovine） 猪（Porcine） 鸡（Chicken） 肉（Muscle） 肝脏（Liver） 肾脏（Kidney） 200 400 环丙沙星（Ciprofloxacin） 恩诺沙星（Enrofloxacin） 牛（Bovine） 肉（Muscle） 肾脏（Kidney） 30 200 下面以恩诺沙星为例，介绍如何根据化合物的结构特点，选择样品前处理所用的SPE小柱和优化提取方法。 图2 恩诺沙星的结构式 恩诺沙星是一个两性化合物，同时具有酸性和碱性特征