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正常肝细胞系Chang Liver及肝癌细胞系HepG2的定量蛋白质组学研究
Lj
正常肝细胞系Changver和肝癌细胞系HepG2的
定量蛋白质组学研究
硕士生姓名： 伍登海
指导教师： 王立明教授
指导小组： 梁锐副教授
孙德光博士
专业名称： 外科学
摘要
目的：采用稳定同位素二甲基标记技术研究正常肝细胞系ChangLiver和肝
癌细胞系HepG2的定量蛋白表组学，筛选肝癌的发生、耐药、转移和切除后复发
等病理过程中可能发生作用的差异蛋白，为采用稳定同位素二甲基标记细胞蛋白
的肿瘤定量蛋白质组学研究提供方法学基础
方法：采用稳定同位素二甲基标记技术，使用CH：O和CD：O分别标记正常肝细
胞系ChangLiver和肝癌细胞系HepG2蛋白酶解肽段，并且以阳离子交换色谱一反
相色谱(SCX—RPLc)为分离模式的新型二维微柱液相色谱分离，最后进入LTQ
orbiTrap质谱检测。
结果：一共鉴定得到3052个肽段，相对定量1006个蛋白，其中定量至少由
两个肽段鉴定得到的蛋白有519(51．6％)个，定量至少由三个肽段鉴定得到的蛋
过Gene
共鉴定得到了188个差异蛋白。
结论：1．采用稳定同位素二甲基标记技术，使用CH：O和CD。0分别标记正常肝
细胞系ChangLiver和肝癌细胞系HepG2蛋白酶解肽段，并且以阳离子交换色谱一
反相色谱(SCX-RPLC)为分离模式的新型二维微柱液相色谱分离，最后进入LTQ
0rbiTrap质谱检测，一共鉴定得到188个差异蛋白，这些差异蛋白可能在肝癌的
发生、耐药、转移和切除后复发等病理过程中发挥重要作用，为肝癌的深入研究
提供了大量的生物学资料。 ‘
2．稳定同位素二甲基标记技术是定量蛋白质组学研究中高效、直接及快速的
化学性引入的标记方法，本实验为采用稳定同位素二甲基标记细胞蛋白的肿瘤定
量蛋白质组学研究提供了方法学基础。
关键词：定量蛋白质组学稳定同位素二甲基标记肝癌质谱技术差异蛋白
line
Quantitativeofliverimmortalizedcell
proteomics Chang
Liv( cellcelllineueH
andanolivqIIvercancercancer
reviL2GpeH e1)
Master
degreecandidate：Deng．HaiⅥ町
Supervisor：ProfessorLi-MingWang
Rui
Vice．supervisor：ProfessorLiang
Doctor Sun
De．Guang
Major：Surgery
Abstract
differential which exertfunctionin
Objective：Toidentify proteins may
to
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