氧化型甘露聚糖修饰的肺癌A549肿瘤细胞抗原增强树突状细胞呈递能力的实验探究.pdfVIP

·中文论著摘要· 氧化型甘露聚糖修饰的肺癌A549肿瘤细胞抗原增强 树突状细胞呈递能力的实验研究 目 的 l、应用柱层析法，制备氧化型甘露聚糖化合物，用化学方法将其与肿瘤细胞 抗原相连接，为下一步作为糖基化肿瘤细胞抗原致敏DC做好准备。 2、通过观察糖基化抗原负载DC后的细胞形态、表型、细胞因子分泌以及诱 导T淋巴细胞增殖情况，探讨糖基化抗原对DC生物学功能的影响。 3、通过检测糖基化抗原负载DC后激活的CTL对肿瘤细胞的杀伤率的影响， 评价DC负载糖基化抗原后诱导的抗肿瘤免疫效果情况。 方 法 1、4％多聚甲醛分别固定肺癌A549细胞(fixedA549，f-A)和氧化型甘露聚糖修 饰的肺癌A549细胞(ox．M．A)获得两组肿瘤细胞抗原，分别定义为对照组和实验 组。 bloodmononuclear 2、取患者外周血分离单个核细胞(peripheral cell，PBMC)， 联合应用重组人粒细胞．巨噬细胞集落刺激因子、重组人白细胞介素．4和重组人肿 dendritic 瘤坏死因子．0【，诱导其为成熟树突状细胞(mature cells，mDC)，使其分别负 载两组肿瘤细胞抗原。 3、用倒置显微镜观察实验组和对照组DC形态上的变化。 的免疫表型的变化。 5、用ELISA法检测实验组与对照组DC培养上清液中IL．12p70分泌水平。 6、CCK8法检测实验组与对照组DC激活CTL对肿瘤细胞的杀伤活性的改变。 耋口结果术 1、获得了氧化型甘露聚糖修饰的肿瘤细胞抗原的复合物，与未修饰组形成对 比。 2、倒置显微镜下观察，实验组与对照组比较，实验组的DC细胞在细胞形态 上有更多的树突状／伪足状突起。 88．71％vs41．64％，P0．05)。 高(41．15士2．31vs34．04士3．03，P0．05)。 5、CCK8法检测实验组与对照组比较，前者DC激活CTL对肿瘤细胞的杀伤活性 更强(PO．05)。 结 论 1、氧化型甘露聚糖修饰的肺癌A549肿瘤细胞抗原形成复合物后，可以增强 DC细胞的抗原摄取效率在实验中得到了证实。 2、氧化型甘露聚糖修饰的肺癌A549肿瘤细胞抗原致敏DC后，可上调DC 表面分子表达水平、促进细胞因子的分泌，并有效的诱导T淋巴细胞的增殖。 3、氧化型甘露聚糖修饰的肺癌A549肿瘤细胞抗原致敏DC后，诱导的CTL 杀伤肿瘤细胞的能力增强。 关键词 氧化型甘露聚糖；甘露糖受体；肿瘤细胞抗原：树突状细胞。 2 ·英文论著摘要· Oxidative A549TumorCell Mannan--conjugated the of ability reinforcingantigenpresenting Antigen neldendritictslrltlCleccells ective Obj 1．tomakeuseofcolumn to Oxidative chromatographyprepare Mannan，linking A549TumorCell