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甜荞子粒总黄酮提取工艺优化摘要：为了充分利用荞麦（Fagopyrum esculentum）资源，以内蒙古甜荞子粒为研究对象，利用乙醇提取法提取子粒中总黄酮，并对其工艺进行优化。最终得出荞麦子粒总黄酮提取的最佳工艺条件为乙醇体积分数65%，水浴时间80 min，水浴温度60 ℃，料液比1∶20（m/V，g∶mL）。 关键词：荞麦（Fagopyrum esculentum）子粒；总黄酮；芦丁；提取 中图分类号：TS201.1；S517 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）02-0412-03 荞麦（Fagopyrum esculentum）又名三角麦，是一种药食兼可的蓼科双子叶植物。有研究发现，荞麦具有独特的营养价值，不仅富含包括赖氨酸在内的人体必需的8种氨基酸，而且富含油酸、亚油酸以及硒、镁、钙、锌等矿物元素和VB1、VB2、VPP等维生素[1]。此外，它还能有效地降低糖尿病、高血压病和心血管病等“富贵病”的发病率，而发挥这些药理活性的物质主要是荞麦中所含的黄酮类化合物[2]。其药理作用主要体现在消炎、抗病毒、抗肿瘤[3，4]，抗心肌缺血和心律失常[5，6]，抗自由基能力强[7]，镇痛效果好[3]，具有激素的兴奋和抑制的双重效应[8]等方面。 由于荞麦具有良好的保健和医用效果，目前中国对荞麦的综合开发研究也方兴未艾。由于苦荞的总黄酮含量高于甜荞，国内的多数研究集中于苦荞。虽然甜荞的营养成分较苦荞略低，但是它在中国的分布更为广泛，特别是内蒙古是中国荞麦的主要产区之一，有着非常好的地域和资源优势。基于此，研究以内蒙古特有荞麦为试验材料，确定其总黄酮提取的优化工艺条件，以期为充分开发利用内蒙古的荞麦资源提供一定的理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 原料 荞麦来源于内蒙古乌兰察布市四子王旗荞麦农家。 1.1.2 仪器 722N可见光分光光度计购自上海精密科学仪器有限公司，数显恒温水浴锅购自常州国华电器有限公司，FW80型高速万能粉碎机购自上海圣启仪器仪表有限公司，鼓风烘干箱购自宁波机电工业研究设计院，HS·Z68·20型电热蒸馏水器购自北京市永光明医疗仪器厂。 1.1.3 药品与试剂 芦丁标准对照品购于北京药品生物制品检定所；无水乙醇为分析纯；50 g/L NaNO2、10 g/L AlCl3、100 g/L Al（NO3）3、10 g/L和40 g/L NaOH、1%盐酸，以上试剂均为分析纯用去离子水按常规方法配制。 1.2 方法 1.2.1 芦丁标准曲线的绘制 准确称取经110 ℃干燥至恒重的芦丁标准对照品0.010 0 g，用65%的乙醇定容于50 mL容量瓶中，配制成0.2 mg/mL的黄酮类化合物的标准液。分别取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 mL于10 mL量筒中，然后用65%的乙醇定容至刻度线处。再将各量筒中不同浓度的标准液进行如下操作：分别取1 mL于试管中，加65%的乙醇1.5 mL，再加入50 g/L NaNO2溶液0.5 mL，摇匀静置6 min后，加0.5 mL 100 g/L Al（NO3）3，摇匀后静置6 min，再加入2 mL 40 g/L NaOH溶液，摇匀后静置10 min，用722N可见光分光光度计于510 nm处测定不同浓度下的吸光度。最后根据测得的吸光度与浓度的关系绘制芦丁标准曲线（图1）。由标准曲线可得回归方程式：y=2.386 9x-0.009 1（r=0.991 8）。其中，x为芦丁标准对照品的浓度（mg/mL）；y为于510 nm处测得的吸光度。总黄酮提取率的计算式： 总黄酮提取率=X×V/（W×1 000）×100% 式中，X为样品中总黄酮的浓度，mg/mL；V为样品体积，mL；W为样品的质量，g。 1.2.2 单因素试验 1）乙醇体积分数对总黄酮提取率的影响。分别将1.0 g粉碎的荞麦子粒放入9个锥形瓶中，然后分别用30%、40%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%的乙醇浸提，料液比为1∶50（m/V，g∶mL，下同），于55 ℃恒温水浴锅水浴80 min，确定不同体积分数乙醇对总黄酮提取率的影响。 2）料液比对总黄酮提取率的影响。在水浴时间为80 min，乙醇体积分数为60%，水浴温度为55 ℃，且水浴两次的条件下，分别用料液比为1∶10、1∶20、1∶30、1∶35、1∶40、1∶50和1∶60的溶液浸提，确定不同料液比对总黄酮提取率的影响。 3）水浴温度对总黄酮提取率的影响。在乙醇体积分数为60%，水浴时间为80 min，料液比为1∶40，水浴两次的条件下，分别于40、50、55、60、65、