稳定转染TDP-25对运动神经元电压门控钠通道的影响和N-乙酰半胱氨酸对钠通道的调节作用.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………．．1 英文摘要………………………………………………………………．5 英文缩写………………………………………………………………．10 研究论文稳定转染TDP．25对运动神经元电压门控钠通道的影响及N． 乙酰半胱氨酸对钠通道的调节作用 —1L—j一 日IJ舌………………………………………………………………11 材料与方法…………………．……………………………………14 结果………………………………………………………………19多口7K………………………………………………………………l 附图………………………………………………………………23 讨{仑………………………………………………………………28 结论………………………………………………………………．30 参考文献………………………………………………………．．31 综述 电压门控钠通道：结构、功能、相关疾病及药物………………．．35 致谢…………………………………………………………………………．．48 个人简历……………………………………………………………………．．49 万方数据 中文摘要 稳定转染TDP．25对运动神经元电压门控钠通道的影响及N．乙 酰半胱氨酸对钠通道的调节作用 摘 要 lateral 肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic 系统变性疾病，临床常表现为上、下运动神经元均受累的混合性瘫痪，该 病呈进行性加重，最终导致死亡。本病的病因及发病机制尚不清楚，可能 与遗传易感性、兴奋性毒性、氧化应激、营养代谢等多种因素相关。病理 性蛋白聚合物，即泛素化包涵体，是ALS的主要特征，并且无论在家族 有毒性作用，它可促进TDP．43包涵体的形成，对细胞造成损伤，导致神 经元发生变性，但其具体致病机制尚不清楚。 许多目前对神经元兴奋性的了解来源于对ALS相关mSODl突变基 因的研究，以往的研究发现，无论是散发性还是家族性ALS患者均表现 出皮层的高兴奋性，因此我们推测两者存在相同的致病机制。细胞在代谢 过程当中会产生一系列的活性氧自由基(reactive species，ROS)， oxygen 正常情况下ROS的产生和清除之间处于一种平衡的状态而使细胞免受自 由基的损伤。研究表明，突变TDP．43诱导了氧化应激，导致了ROS产 生与清除之间的失衡及线粒体功能损伤，不同的氧自由基成分可直接增强 细胞电压门控钠通道的活性，通过改变钠通道的特性提高细胞兴奋性。本 实验室以前也己证明，在TDP．43细胞模型中，氧化应激及线粒体功能损 伤同时存在，这种损伤可被一种安全有效的抗氧化剂双甲氧姜黄素改善。 sodium 电压门控钠通道(Voltage．gated channels)在动作电位的起始和传播中起到关键作用，这是形成细胞兴奋 性的基础。因此本实验的首要目的是研究TDP．25对运动神经元细胞系电 压门控钠通道的影响来评估其对神经元兴奋性的改变。N．乙酰半胱氨酸 其分子中的巯基(-SH)可作为H+供体直接发挥抗氧化作用，另外它还可 以合成具有生物活性的谷胱甘肽，间接发挥抗氧化作用。另有研究表明， 万方数据 中叉捅要 其具有较强的干扰自由基生成及清除已生成的活性氧自由基、抗细胞凋 亡、调节基因表达及信号转导等作用。因此，本实验的第二目的是探讨突 变组加入不同浓度NAC后，钠通道电生理特性是否发生改变。通过实验 结果分析ALS可能的