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农杆菌介导外源基因的转化棉花上胚轴方法的研究
农杆菌介导外源基因转化棉花上胚轴方法的研究
阳立恒1,3，郝秀英2,3，曲延英1
（1.新疆农业大学农学院，新疆乌鲁木齐，830052；2.南京工业大学，江苏南京，210009；3.新疆农业科学院微生物应用研究所，新疆乌鲁木齐，830091）
摘 要：以棉花感受态萌动的上胚轴作为外源基因转化的受体，用农杆菌介导法将携带有筛选标记NPTII(新霉素磷酸转移酶)基因及GFP(绿色荧光蛋白)报告基因导入棉花，经卡那霉素筛选已经获得抗性小植株，取抗性植株叶片在紫外光激发下显示出绿色荧光。研究了农杆菌介导法用于棉花感受态萌动上胚轴转化预培养时间，浸菌时间，共培养时间及抗生素处理浓度等。研究表明：用农杆菌转化处理上胚轴是一种操作简单、重复性好、非基因依赖型的转化方法。
关键词：棉花；上胚轴；直接器官发生；农杆菌介导；非基因依赖型转化
Studies on Introduction of Antifungal Genes into Cotton epicotyl Via Agrobacterium-mediated
YANG Li-heng1,3, HAO Xiu-ying2,3, Qu Yan-ying1
(1.College of Agronomy,Xinjiang Agriculture University, Xinjiang Urumuqi,830052; 2.Nanjing University of Technology, Jiangsu Nanjing, 210009; 3.Institute of Microbiology, Xinjiang Academy of Agricultural Science, Xinjiang Urumuqi, 830000)
Abstract： Using cotton susceptive germinating epicotyl as transgenic receptor,There are NPTⅡ(neomycin phosphotransferase Ⅱ)gene as screening marker and GFP(green fluorescent protein)as a report gene,which were introduced into cotton by Agrobacterium-mediated transformation.From treated epicotyl by Agrobacterium-mediated transformation,resistant plantlets have been obtained after kanamycin resistance screening．Under irradiation of UV,the green fluorescence could
be observed from the leaf of resistant plantlets.In this research,we have also studied
基金项目：新疆农业科学院院长基金项目 (2007Y09)。
作者简介：阳立恒（1981—），女，湖南籍，在读硕士，主要从事植物转基因研究。
E-mail ouyangxjnd@,tel:0991-3813610
通讯作者：郝秀英（1964－），女，河北籍，博士，副研究员，主要从事植物转基因研究。
E-mail：haoxy6420@163.com,telsome key factors that influenced Agrobacterium-mediated transformation,such as the
duration of pretreatment of susceptive germinating epicotyl,duration of infection, duration of co-culture and the concentration of antibiotic treatment,and so on.The results indicated that the Agrobacterium-mediated transformation was easy to operate,repetitive and genotype independent transformation.
Key words: cotton(Gossypium hirsutum L.and Gossypium barbadense L.); epicotyl;
di
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