热力灭菌及无菌保证的.PDFVIP

热力灭菌及无菌保证的 基本概念 山东省医药工业设计院 1 热对活细胞的作用 热力灭菌是研究最深、使用最广 的灭菌方式。当温度超过细胞最佳生 理活动的温度范围时，随着温度的升 高，细胞代谢减缓，最终细胞的生长 及繁殖将停止。 2 热对活细胞的作用 从微观上看，不具备真正核膜结构 的原核细胞耐热性最强。但是，绝大多 数生长态菌在80～100 ℃下即可被迅速 杀灭。具备核膜结构的真核微生物，在 60～80 ℃下就可被迅速杀灭。多数病毒 的耐热较差，只有乙肝病毒（HBV ） 例外，它要在75 ℃下至少曝热3min才 能被灭活。 3 热对活细胞的作用 还有一些其他类型的生物体也具有 较强的耐热性。例如，痉挛性假麻痹症 的蛋白侵袭子病原体，它既不属细胞型 微生物也不属病毒，需要在132 ℃下加 热1h才可完全杀灭。 4 热对活细胞的作用 在细菌中，需氧菌中的芽孢杆菌属和厌 氧菌中的梭状芽孢杆菌属也具有较强的耐 热性。这些细菌的细胞能产生内源性孢子 或胞间休眠体，一旦形成这种状态，它们 对热、干燥及化学消毒剂的耐受性增强。 要想杀灭这类芽孢，使之下降一个数量级 （一个对数单位），如以干热灭菌及湿热 灭菌的灭菌率L 来计算，芽孢被杀灭困难 的程度比其生长态时增大了104～105倍。 5 热对活细胞的作用 芽孢形成时，细菌停止生化反应， 交将遗传物质包藏在芽孢中。此过程 中发生了一系列生理变化：细胞质大 量脱水，体积变小，在变小的原生质 体周围形成了一层厚壳，此过程中， 还生成了一种特殊化学物质——吡啶 二羧酸或吡啶－26 －二羧酸。 6 热对活细胞的作用 在芽孢形成阶段，吡啶二羧酸钙 能与脱氧核糖核酸以及细胞内的酶形 成复合物，从而对休眠状态的芽孢起 保护作用。处于休眠状态的芽孢可以 存活很多年，在适宜的条件下，它们 在数分钟内即可恢复到生长状态。 7 影响灭菌效果的因素 1、物理/化学条件 在细菌形成芽孢过程中的多种环境因素 会影响孢子的耐热性。例如，温度较高并有 二价阳离子（如 Ca2+ 、Fe2+ 、Mg2+ 、Mn2+ ） 存在时，芽孢的耐热性增强；与此相反，当 pH 超出 6.0~8.0 的范围时，或在高浓度的盐 水或磷酸盐中形成芽孢时，其耐热性下降。 8 影响灭菌效果的因素 自然界中芽孢子的耐热性与环境 条件相关，如溶液浓度、水分（相对 湿度）、pH、对芽孢有损伤作用的物 理因素以及对芽孢有抑制作用的化学 品等，它们均会影响芽孢的耐热性。