许文中硕士论文 - 颅脑疾病重点实验室 - 宁夏医科大学.doc

0分类号：R6 单位代码：10752 密 级：公 开 学 号：2008181 宁夏医科大学 硕士研究生学位论文 岛叶点燃癫痫大鼠海马Arc、BDNF、TrkB表达及其与学习记忆的关系 Relationgship between insular epilepsy and amygdala epilepsy rats hippocampus expression Arc 、BDNF、TrkB and learning and memory. Relationgship between insular epilepsy and amygdala epilepsy rats hippocampus expression Arc 、BDNF、TrkB and learning and memory Student’s Name: Xu Wenzhong Supervisor: Suntao Subject Category: Medicine Major: Surgery Specialty: Basic and clinical study of Epilepsy School: Clinical School Completion Date: March 2011 宁夏医科大学学位论文独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名＿＿＿＿＿ 论文导师签名＿＿＿＿＿ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明 宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。 （保密论文在解密后应遵守此规定） 论文作者签名＿＿＿＿＿ 论文导师签名＿＿＿＿＿ 年 月 日 年 月 日 岛叶点燃癫痫大鼠海马Arc、BDNF、TrkB表达及其与学习记忆关系的研究 摘要 目的 电刺激Sprague-Dawley大鼠岛叶，建立慢性电点燃癫痫模型，通过避暗试验观察癫痫大鼠不同时间段学习记忆功能，检测活性骨架调节蛋白（Arc）、脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)在岛叶慢性电点燃癫痫大鼠海马组织中表达，探讨Arc、BDNF、Trkb与学习记忆之间的关系。 方法 1.岛叶慢性电点燃癫痫模型建立与学习记忆相关性研究：健康雄性SD大鼠216只，随机分为岛叶点燃组、假手术对照组及空白对照组，假手术组大鼠只植入电极及测定后发放阈，不行电刺激点燃。点燃组建立岛叶慢性电点燃模型。点燃组分0周、1周、2周、3周、4周几个亚组。观察各组大鼠行为学改变及脑电生理变化，采用避暗试验方法记录各组大鼠潜伏期（LT）及穿梭次数（EN），研究其学习记忆变化。 2.大鼠海马Arc、BDNF、TrkB的表达与学习以及的关系：大鼠单笼饲养，避暗试验后，无外界刺激无痛处死假手术对照组及空白对照组大鼠，每组取大鼠n=12只。点燃组每亚组避暗试验后于1h、3h、6h、12h、24h等不同时间点无痛处死大鼠，每时间点取大鼠n=12只；取1h、3h、6h、12h等时间检测Arc表达，取1h、12h、24h等时间检测BDNF、TrkB表达 [7-9]。每组大鼠一半用乙醚麻醉后断头取脑，迅速取出海马组织，分别放于冻存管中，置于液氮后再移至-80℃冰箱以备用，另一半经乙醚麻醉后用4%多聚甲醛灌注后取全脑放于蔗糖溶液分别梯度过夜脱水，应用OTC（Sakura, USA）-80℃冰箱保存以备组织切片用。标本应用免疫组化、RT-PCR和western blot等技术方法研究岛叶电点燃致癫大鼠海马Arc、BDNF、TrkB mRNA及蛋白的表达并探讨与学习记忆的关系。 结果 1、岛叶慢性点燃后大鼠自行癫痫发作，检测大鼠脑电波可收集典型的癫痫脑电波模型。模型制作点燃成功率为92.4%。空白组避暗试验结果LT为（5