实验一 - 进入后台管理系统.doc

生 物 化 学 实 验 徐州师范大学生命科学学院生化教研组编 二零零九年八月 目 录 一、实验室须知 …………………………………………………1 二、实验部分 1.总糖的测定——蒽酮比色法 ………………………………………………7 2.糖类的性质实验--糖类的颜色反应………………………………………10 3.蛋白质的两性电解质性质及等电点的测定………………………………11 4.酪蛋白的制备………………………………………………………………13 5.双缩脲法测定蛋白质含量…………………………………………………14 6.考玛斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量（选）……………………………16 7.醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白………………………………………18 8.酶的性质实验………………………………………………………………21 9.酵母细胞的固定化…………………………………………………………25 10.DNA、 RNA的提取及性质鉴定 …………………………………………26 11.薄层层析法分离鉴定核苷酸 ……………………………………………31 12.维生素C的定量测定（磷钼酸铵法） …………………………………32 （2，6-二氯酚靛酚法）…………………………………34 13.血糖浓度的测定及胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 ……………37 14.脂肪酸的β-氧化 ………………………………………………………38 15.过氧化物酶同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳 ……………………………40 16.胰凝乳蛋白酶的制备 ……………………………………………………43 17.氨基移换反应的定性鉴定及氨基酸的纸层析 …………………………44 18.核酸的提取及性质鉴定（设计性实验） ………………………………46 19纤溶酶的纯化与鉴定（综合性实验） …………………………………47 20.γ-球蛋白的分离纯化与鉴定（综合性实验）…………………………50 21.血红蛋白的纯化与鉴定（综合性实验） ……………………………… 附录……………………………………………………………………………54实验室须知 生物化学是生命科学中发展最迅速的前沿学科之一，其理论已和医学、遗传学、微生物学、免疫学、生物学等相互交融、互相渗透。它的实验方法和研究手段已成为众多学科间共同拥有的技术。这门实验技术将为你今后的研究工作提供科学的思维、严谨的方法。 进入实验室之前，细细阅读《实验须知》。对于实验室常识、规则、安全等你应熟知，玻璃器皿的处理你应小心，微量移液器(枪)的正确使用你应掌握。当你步入实验室后，每做一个实验，都应养成“预习一操作一小结”良好习惯。 预习：有二层含义，即预习和做笔记。预习是为复习、巩固先前所学理论知识，是要运用这些知识解释实验原理、实验现象。对于每步操作，不仅要知其然，更应知其所以然。每加一种试剂都应问一个“为什么”?实验中应掌握什么?了解什么?注意什么等等你都应圈圈点点，记录在案，心中有数，有备而行，你的实验就取得了一半的成功。 操作：假如你对于实验操作及其依据的理解得非常透彻，那么不仅使你顺利进行试验，又为你在实验室内节约大量时间。严格遵守实验规则，按部就班实验操作(在独创性研究中是没有操作步骤可循的，它是建立在渊博理论知识基础之上的)，详细记录试验中每一细小变化，记录有关现象，准确地记下数据。小结：实验报告的格式可因指导教员的风格而有所差异，但基本点都应该是书写工整、内容翔实、表述清晰、分析得体、文字流畅等。 一、实验室规则 1．保持肃静 不许喧哗、打闹，创造整洁、安静、有序的实验环境。 2．保持整洁 实验时应穿工作服，书包等物品按规定放置整齐，不许乱丢污物和随地吐痰。实验结束后，清整器材，彻底清洗试管、烧杯等实验用品，物归原处，实验废品(火柴棍、滤纸等)放指定地方，不得随意乱丢。 3．严格操作 认真预习、切忌盲目、做好准备、提高效率。实验时严格遵守操作规程，仔细观察，作好记录，认真书写实验报告，不合格者必须重写。枪头、滴管专用专放、防交叉污染。使用仪器必须在教员的指导下进行，不得随意乱动。使用枪时，必须先熟读“枪的使用方法”，玻璃器皿轻拿轻放。 4．注意节约 爱护标本、器材，节约试剂、水电、防止破损浪费。无故损坏酌情赔偿。 5．保证安全 室内严禁吸烟。用试管加热煮沸时，管口不能对人。使用危险、有毒物品时严格按要求操作，使用同位素应注意防护和防止污染。如有意外立即报告。实验完毕，清洁卫生，关好门、窗、水、电等。 二、实验室常识 1．凡挥发性、有烟雾、有毒和有异味气体的实验，均应在通风柜内进行，用后试剂严密封口，尽量缩短操作时间、减少外泄，操作者最好戴口罩，手套。 2．凡使用有机溶剂，记住两点：第一，许多有机溶剂易燃(乙醚、丙酮、乙