6-2第六章 纤维素酶.ppt

纤维素酶 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 一、纤维素酶的特性及来源 二、纤维素酶的生产 三、纤维素酶的应用 纤维素酶的应用 教材及参考书 谢 谢! 纤维素酶的固态发酵生产 工艺操作 ③纤维素酶制剂的制备 将打碎晾干后的成品曲进一步粉碎，①若生产饲用纤维素酶，则可再经气流干燥，即制得酶制剂粗品； ②若制备纤维素酶纯品，则将粉碎的成品曲在28 ~ 30℃下用3倍水量浸泡2~3h，压滤机压滤或抽滤机抽滤，所得滤液用硫酸铵或乙醇沉淀，沉淀酶经压滤、干燥，再加稳定剂、经标准化混配后即成酶制品。沉淀时上清液，经离心去杂，再经超滤浓缩、喷雾干燥后回收酶粉。 纤维素酶液态深层发酵生产 里氏木霉 茄子瓶 孢子悬液 硫酸铵或乙醇沉淀 粉碎包装 干燥 种子罐 超滤浓缩 菌种斜面 摇瓶扩培 发酵罐 过滤得 上清液 液体酶 生产流程 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ①种子罐培养 培养基成分可采用以下配方（质量分数,％）：稻草粉1、麸皮 0.5、葡萄糖1、 (NH4)2SO4 0.2、KH2PO4 0.1、CaCO3 0.1、Tween-80 0.02，pH 5.5～6.0。121℃下灭菌30min，冷却后，接入三角瓶摇瓶种子或茄子瓶孢子悬液，28～30℃下培养24～36h，以备发酵罐接种用。 纤维素酶液态深层发酵生产 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ②发酵罐培养 发酵培养基为（质量分数,％）：稻草粉5、麸皮0.5、蛋白胨0.3、 (NH4)2SO4 1、KH2P04 0.4、CaCl2·2H2O 0.2，MgSO4·7H2O 0.03，Tween-80 0.02，pH 5.5～6.0。121℃下灭菌30min，冷却后，接入种子罐培养物，于28～30℃下培养96~120h。 纤维素酶液态深层发酵生产 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ②发酵罐培养 发酵过程中温度的控制--发酵前期，培养温度应稍高些,以利于菌体的生长，里氏木霉一般控制前期培养温度为30℃。进入产酶期后，应适当降低培养温度，一般为28℃,较低的温度有利于提高酶的稳定性，延长细胞产酶时间。 纤维素酶液态深层发酵生产 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ②发酵罐培养 发酵过程中pH的控制-- 随着发酵的进行，体系的pH逐渐下降，此时不予控制，当pH降至3.0以下时，可通过加入2mol/L的氨水来控制发酵液的pH维持在3.0±0.1，有利于产酶。发酵后期，随着培养基成分的逐渐耗尽，pH开始有所回升，此时不再加氨水，让pH自然上升，直至放罐。 纤维素酶液态深层发酵生产 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ②发酵罐培养 发酵过程中通气量的控制-- 里氏木霉是好氧菌，氧的不足将影响其生长和纤维素酶的产生，所以应保证发酵液中合适的溶氧量。发酵早期，菌体刚刚萌发，菌丝体数量较少，耗氧速率较低，应控制通气量为1:(0.2～0.3)；进入对数生长期后，菌体代谢旺盛，细胞大量分裂，菌丝体大量形成，此时耗氧速率加快，应控制通气量为1:1；产酶期，菌丝体数量最多，产生大量的酶蛋白，也消耗大量的氧气，应保持通气量为1:1。 纤维素酶液态深层发酵生产 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ②发酵罐培养 放罐的判断-- 以发酵液pH不再下降或回升，纤维素酶活力不再升高，并伴随发酵液黏稠度明显降低作为放罐的依据。一般发酵周期在96～120h，发酵结束时，发酵液的滤纸酶活力(FPA)一般可达5～10U/mL，CMC酶活力可达60～100U/mL。 纤维素酶液态深层发酵生产 α-淀粉酶的固态发酵生产 工艺操作 ③纤维素酶的提取 将发酵液过滤，除去固形物和菌丝体，得清液。 若生产液体酶,可将清液超滤浓缩5～7倍，制成液体酶。对于固体酶的生产，先将清液pH调至4.5(纤维素酶等电点附近)，然后进行硫酸铵或乙醇沉淀，离心或过滤得沉淀，将沉淀低温干燥后粉碎，即得纤维素酶粉。 纤维素酶液态深层发酵生产 纤维素酶的应用极其广泛，几乎渗透到了一切以植物为原料的加工业，如纺织、饲料、酿造、果汁与蔬菜加工、粮食加工、造纸、中草药有效成分提取等各个方面。近年来，随着能源问题的日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆原料生产纤维燃料乙醇等新型能源的命题更是提到了日程上来。 在饲料中的应用 在酿造中的应用 在食品加工中的应用 在开发新能源中的应用 在纺织业中的应用 高职高专十一五