REACH法规 第五卷译稿-28.docVIP

C.20 DAPHNIA MAGNA（一种水蚤）的繁殖试验 方法 这种繁殖毒性测定的方法是OECD TG 211 (1998)的一个翻版。 引言 本试验的主要目的是评估的的化学因素对水蚤繁殖的产量的影响。 定义和单位 母本：是那些在试验开始出现的雌性水蚤，它们的繁殖的产量是本测定研究的目标。 后代：是本试验中由母本繁殖的那些年轻的水蚤。 最低可观察效应浓度(LOEC)：是最低的可观测的繁殖上有重大的统计学意义且在一个规定的暴露时期里其母本和对照对比死亡率p0.05的试验浓度。 然而，所有超越LOEC上的浓度有害影响一定不低于那些在LOEC内观察到的浓度。当这两个条件不能够被满足时，一定要给出一个LOEC（和所以NOEC）被选择详尽的解释。 没有可观察的效应浓度(NOEC)：是直接在LOEC之下的在一个规定的暴露时期里和对照对比没有重大的统计学作用(p 0.05)的测定浓度。 ECx: 是测定的物质溶解在水中的浓度，其实验结果是在一个规定的暴露时期里水蚤的繁殖有X%缩减量。 内在增长率：是群体数量增长导致繁殖产量和特殊年龄的死亡率(20) (21) (22)的度量。在一个稳定数量的状态它将使零。对正在增长的群体数量它将是正的而对正在减少的群体数量而言它将的负的。显然，后者数量是不能维持的最终将导致消失。 检出限：是最低的能检测到而不能定量测定的浓度。 检测限：是最低的能从数量上量化的浓度。 死亡率：出现以下稳定的情况：如，当水蚤不能游动，或搅动测定的容器后其肢体或后腹部在内在15秒内没有可观察的运动，一个动物即被纪录成死亡。(如果用另外一种定义，必须和参考文献一起交代。) 1.3. 测定方法原理 在本测定开始时年轻的年龄小于24小时的雌水蚤(母本)，被暴露在溶于水中的在浓度范围内的测定物质。测定的持续时间是21天。在测定的最后，每一个活着的母本繁殖的后代总共的数量被评估出来。这意味着由死去的成体繁殖的年轻的水蚤被排除在计算之外。再生的母本产量能用另外的方法(例如，观察从第一天开始每天每个母本繁殖的后代的数量)表达，但这些方法必须在测定的结尾记录以除在每个母本繁殖的年轻的水蚤总数之外。被暴露在测定物质中的水蚤的生殖产量和对照对比用来得出最低可观察效应浓度(LOEC)和没有可观察的效应浓度(NOEC)：另外，就可能而言，数据被用一个衰退的模型来分析用来估计引起生殖产量(例如， EC50，EC20，或EC10) x%缩减的浓度。 存活的母本水蚤和第一代产生的时间也必须纪录下来。另外在参数上有影响的有关物质如生长(如长度)和可能的内在的增长率也可能考虑。 1.4. 测定物质信息 用水蚤来完成的一个剧毒性的测定(参见C.2, Part I中的方法)实验结果应是有意义的。实验结果对生殖测定中选择适当的浓度范围可能是有用的。 水的溶解性和测定物质的蒸汽压应该知道，并且报告中应给出能定量测定该物质的可靠分析方法、物质的回收率以及方法检出限。 有关本测定的在建立测定条件上可能有用的物质的资料包含：结构式，物质的纯度，光源的稳定性，在测定条件下pKa, Pow的稳定性和测定中已有的生物降解能力的(见 C.4中方法)实验结果。 1.5. 测定的有效性 一个测定的正确性，以下的性能标准应和对照相适应： ——测定最后(雌性水蚤)母本的死亡率不超过20%； ——测定最后每一个母本产生的存活的后代的平均数目≥60。 1.6. 测定方法描述 1.6.1. 仪器 测定容器和其它接触测定液的仪器都必须全部用玻璃或其它化学惰性的材料制造。测定的容器通常是大烧杯。 另外，以下设备是必需的： ——氧气计量器（附带微电极或其它适合测量小容量样品中溶解的氧气）； ——适当的控温装置； ——pH计； ——测定水的硬度的设备； ——水中有机碳含量(TOC)测定的设备或化学需氧量(COD) 测定的设备； ——适当的仪器来控制光源和测量光强。 1.6.2. 有机体测定 用在测定中的是Straus水蚤。其他种类的水蚤可用来为它们提供适当的正确性的标准（在对照中的和繁殖产量相关的正确标准应和水蚤的种类相关）。如果其它种类的水蚤被采用，必须很清楚地鉴别它们并被证明使用该类水蚤是恰当的。 更适宜地，无性生殖应通过基因型被鉴别。研究(1)表明，无性系A(起源于法国的IRCHA) (3) 的繁殖的性能始终和用这种方法培养的情况下每一个母本产生的存活的后代的平均数目≥60的标准相一致。然而，对一测定来说另外的无性生殖是可接受的假如水蚤培育看起来和正确的标准相一致的话。 在测定的开始，动物年龄应该小于24小时且不可以是最初的为繁殖而饲养的后代。他们必须来源于一个健康的亲本（如，没有明显的症状如：高死亡率，雄性和ephippia存在，最初的为