绿茶多酚对甲醛致内皮细胞株(HUVEC-12)损伤影响及其机制.pdfVIP

主要英文缩略语索引 英文缩写 英文全称 中文全称 FA formaldehyde 甲醛 GSH glutathione 谷胱甘肽 GTP green tea polyphenols 绿茶多酚 HUVEC human umbilical vein endothelial cell 人脐静脉内皮细胞 iNOS inducible nitric oxide synthase 诱导型一氧化氮合酶 LDH lactate dehydrogenase 乳酸脱氢酶 MDA malonyl dialdehyde 丙二醛 NF-κB nuclear factor-kappa B 核因子κ B NO nitric oxide 一氧化氮 SOD superoxide dismutase 超氧化物歧化酶 SP streptavidin-peroxidase 过氧化物酶标记的链霉卵白素 SSAO Semicarbazide-Sensitive Amine Oxidases 氨基脲敏感性胺氧化酶 1 绿茶多酚对甲醛致内皮细胞株 （HUVEC-12）损伤的 影响及其机制 研究生：邹云飞 导 师：李东阳 教授 专 业：卫生毒理学 中文摘要 目的：观察甲醛对体外培养的人脐静脉内皮细胞株 （HUVEC-12）的影响，初步探 讨甲醛在心血管疾病发病中的作用机制；观察绿茶多酚 （GTP ）预处理对甲醛所致损 伤的影响，研究其可能的作用机制，为茶多酚防治心血管疾病提供实验依据。 方法：1.甲醛对体外培养人脐静脉内皮细胞株 （HUVEC-12）的损伤及其机制研究： 体外常规培养内皮细胞，取对数生长期的细胞进行实验。分正常对照组和甲醛损伤组 （终浓度为0.05 mmol/L ，0.1 mmol/L，1.0 mmol/L ）加药后培养4h 。应用透射电镜 观察细胞形态学变化，分光光度法检测细胞培养液中SOD 活力，LDH 、MDA 、以及 细胞内GSH 含量的变化，反映甲醛对细胞氧化/抗氧化系统的影响，硝酸还原酶法检 测NO 浓度的变化，并应用SP 试剂盒检测细胞核转录因子NF-κB 蛋白表达水平的变 化。以0.1 mmol/L 甲醛组为研究对象，培养0h、2h 、4h 、6h、8h，检测上述各项指 标，分析甲醛损伤内皮细胞的时效关系。2.绿茶多酚对甲醛致 HUVEC-12 损伤的保 护及其机制研究：设正常细胞组、甲醛损伤组（0.1 mmol/L ）、绿茶多酚组（2.5 mg/L, 5 mg/L, 10 mg/L, 20 mg/L ）。其中绿茶多酚先与细胞预孵12h 后加入甲醛（终浓度0.1 mmol/L ）置CO2 培养箱培养4h ，检测细胞培养液中SOD 活力，LDH 、MDA 、、NO 以及细胞内GSH 含量，SP 试剂盒检测NF-κB 。 结果：1.甲醛可造成内皮细胞损伤，导致细胞膜破裂，LDH 释放增多；2. 甲醛可致 MDA 增加，GSH 减少，SOD 活力减弱，与对照相比，其差异均有统计学意义（P ＜ 0.01 ）；3. 甲醛组NO 含量明显高于对照组，差异有显著性（P ＜0.01 ）；4. 甲醛组NF-κB 的活力高于对照组；5.绿茶多酚组LDH 、MDA 、NO 含量低于甲醛组（0.1 mmol/L ）， 2 而SOD 活力