HIV P55-gag蛋白促进骨髓间充质干细胞的老化.pdfVIP

生 物 医 学 工 程 究 2叭7 JournalofBiomedicalEngineeringResearch… ，，I36(1}：。52～56 l 术 HIVP55一gag蛋 白促进骨髓 间充质干细胞 的老化 袁雅红 ，赵珊珊 ，王小莉 ，腾智平 ，李东升 ，曾毅 (1．北京工业大学生命科学与生物工程学院，北京 100124； 2．湖北医药学院附属太和医院 胚胎千细胞研究湖北省重点实验室，十堰 442000，湖北； 3．中国预防医学科学院病毒所，北京100052) 摘要：探索HIVP55一gag蛋 白对骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenehymalstemcell，BMSC)老化的 影响，进一步阐明HIVP55一gag蛋白抑制BMSC成骨分化的机理。原代分离、培养、纯化BMSC，再将其分两 组进行处理，一组为常规培养对照组(BMSC。。)，另一组为添加HIVP55一gag蛋 白培养组(BMSCgag)；通过 计算培养5、l0、l5及20天的BMSC…和BMSC 的群体倍增水平，比较增殖能力；将培养20天的BMSC。和 BMSC一分别标记 Brdu，免疫荧光法检测 Brdu掺入率，比较两组细胞的增殖水平；通过检测细胞衰老生物标 记B一半乳糖苷酶，比较两组细胞的衰老程度；Western检测两组细胞衰老相关蛋 白P21的表达强度；将两组 细胞诱导成骨分化，比较其成骨分化能力。在培养 15天和20天时，BMSC 群体倍增水平明显低于BMSC． 。 ；BMSC 的 Brdu掺入率明显低于 BMSC…，分别为(26±4．1)％ 和 (45±3．7)％；p一半乳糖苷酶染色检 测显示，BMSC 的衰老细胞数明显多于BMSC。，分别为(21-4-4．7)％和(8±2．1)％；BMSC 的P21的表达 强度明显强于BMSC。。；成骨诱导后，茜素红染色和ALP染色均显示，BMSC 的成骨分化能力明显弱于BM SC 。H1VP55一gag蛋 白促进 BMSC老化 ，进而抑制其成骨分化能力。 关键词：HIV；P55一gag蛋白；骨髓间充质干细胞；老化；成骨分化；骨代谢 中图分类号：R318 文献标识码 ：A 文章编号：1672-6278(2017l01-0052-05 HIV P55-gagProtein PromoteBoneM arrow M esenchymal Stem CellSenescence YUAN Yahong一，ZHAO Shanshan ，W ANG XiaoliI72 TENG Zhiping ，LIDongsheng ，ZENG Yi ， (1．DepartmentofBiomedicalEngineering，BeqingUniversityofTechnology，Bejiing100124，China； 2．HubeiKeyLaboratoryofEmbryonicStemCellResearch，TaiheHospital，HubeiUniversityofMedicine，Shiyan442000Hubei，China； 3．InstituteofVirology，ChineseAcademyofPreventiveMedicine，Belting100052) Abstract：ToexploretheinfluenceofHIVP55一gagproteinonsenescenceofbonemarrowmesenchymalstem cells，furtherclarify themechanism ofBMSCosteogeneticdifferentiationinhibitedbyHIV P55一gagprotein．TheBMSC wereprima~ isolate