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重庆医科大学学报 2017年第42卷第 3期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2017.Vo1.42No.3) 一 327 一
DOI:10.13406~.cnki.cyxb.001200
FSHI3}在骨形态蛋白9诱导小鼠胚胎成纤维细胞
成骨分化中的作用研究
苏晓娅 ,黄 敏 ,刘 宏
(重庆医科大学附属第一医院生殖健康与不孕症中心,重庆 400016)
摘【 要】目的:探讨卵泡刺激素p亚基(follicle-stimulatinghormoneB,FSH31)对骨形态发生蛋白9(bonemorphogenetieprotein9,
BMtO)诱导小鼠胚胎成纤维细胞 mouseembryonicfibroblasts,MEFs)成骨分化中的作用。方法:采用AdEasy系统构建表达绿色
荧光蛋 白(greenfluorescentprotein,GFP)、FSH31和BMP9的重组腺病毒 (Ad—GFP、Ad—FSH31和Ad—BMP0),实验分组为:Ad—
GFP组、Ad—BMP9组、Ad—FsHB组和Ad-BMP9+Ad—FSH31组。运用化学发光定量和组织化学染色法分别检测各组3、5、7d碱
性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性;Westernblot检测成骨分化早期转录因子(Runx2和DLX5)的蛋白表达水平;RT—PCR
检测成骨分化晚期指标骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的mRNA表达水平;茜素红染色检测钙盐沉
积;流式细胞技术检测各实验组细胞的周期分布。结果:在 MEFs中,过表达 FSH31能明显促进 BMtO诱导MEFs骨化过程中第
3天(6874.67-4224.93vs.11935.67-4568.76,P=0.000)、第 5天(43434.67-t-2047.57vs.98913.33±4606.26,P=0.000)、第
7天 (38198.oo4-2376.43vs.78534.67-42114.56,P=O.ooo)的ALP活性 ,转录因子 Runx2(1.171-40.105vs.1.350-i-0.053.P=
0.026)、DLX5(1.3824-0.123vs.1.738-40.286,P--0.001)和晚期成骨指标 OCN(1.300-40.405vs.1.471±0.406,P=O.002)、OPN
(1.300-40.084vs.1.479-40.038,P=-0.016)的表达水平,以及钙盐沉积。此外,FSH31和(或)BMP9对 MEFs细胞周期没有明显影
响(G1期 :F--0.226,P=-0.876;G2期 :F--0.147,P=-0.929;S期 :F=0.027,P=0.994)。结论:在不影响MEFs细胞周期的情况下,FSH31
协同BMtO诱导MEFs成骨分化。
【关键词】骨形态发生蛋白9;卵泡刺激素B亚基;小鼠胚胎成纤维细胞;成骨分化
【中图分类号】R322.54;R322.71;R329.2 文【献标志码】A 【收稿日期】2016—07—30
RoleofFSHI3inBMP9-inducedosteogenicdifferentiation
inmouseembryonicfibroblasts
SuXiaoya,Huang n.LiuHong
(DepartmentofReproductionHealthandInfertility。
eFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity、
A【bstract]Objecave:Tostudytheeffectoffollicle—stimulatinghomroneB(FSH31)onbonemorp
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