高胆固醇血症兔Oddi括约肌细胞钙火花特征及其对Ca～（2%2b）转运的影响.pdfVIP

高胆固醇血症兔oddi括约肌细胞钙火花特征及其 对ca2+转运的影响 研究生：杨向新 导 师：魏经国 教授 中文摘要 背景和目的：Oddj括约肌(sphjncterofOddj，sO)是具有精细分工的肌 性结构，SO与胆囊在激素与神经的作用F，产生协调的收缩、舒张功能， 并通过其收缩、舒张运动维持胆道系统的压力及调控胆汁和胰液的排出。 ofOddi 0ddi括约肌功能紊乱(sphincterdysfuIlction，sOD)是胆道系统及 其它疾病发生的重要动力学诱网之 ，其中高胆固醇(Cholesterol，Ch) 对胆道系统动力学影响己经有文献报道。本实验采用制作高ch血症兔动 物模型、细胞培养、透射电镜及激光共聚焦显微镜技术，观测高ch血症 对SO平滑肌细胞的超微结构、ca2+转运及钙火花(Ca2+s口arks)特性的影 响，探讨SOD的发生机制与Ca2+的调节作用之间的关系。 方法：纯种新两兰兔32只，随机分为2组，每组16只。对照绢饲以标准 饲料，实验组饲以标准饲料+ch，共8wk。两组sO分别进行常规制片，透 射电镜观察：细胞原代培养，Fluo一3／AM负载，用激光共聚焦显微镜对照 观测静息状态及3．6mm01．L“Mgs04作用下sO胞内ca”([ca”】．)浓度变 化及钙火花特征。 结果： 1 高ch血症兔Oddi括约肌部分肌细胞骨架结构排列紊乱，密体、密斑 分布不均，数量减少，肌丝扭曲、疏松；细胞器肿胀、扩张。可见少量合 成表型平滑肌细胞及肌成纤维细胞。 2静息状态F，实验组sO细胞【ca2+]i为(21．07±O82)，明显高于对照组 38±O 05)，且 下降速率(O87±O．14)·s～，明显低于对照组(122)·s。，(PO 681±O 40±O [Ca2]．峰徉值(1 05)高r对照组(616)，(PO05)，下降幅度 77±2 Ol (23．59±122)％明显低于对照组(50 56)％，(JD005)，恢复速率(O 41±0 05)。钙火花特征：静 ±O．00)．s“明显低于对照组(004)·s～，(尸O 息状态下，实验组与对照组钙火花频率、幅度、持续时间分别为(1．28± 39±o 频率(1 02)·s～·cell_l，较对照组(161±0．02)·s～·cell“明显减慢 ±0 05)。 21)、260ms，两组问无显著差异pO 结论： 1 高Ch血症影响兔SO细胞的超微结构，使质膜结构利功能受损，改变 细胞骨架的构型及数量，可能导致sO功能异常。 2 高Ch血症引起SO肌细胞Ca2+转运障碍，[ca2+]i稳态失衡，处于超载 状态。sOD与细胞【ca2+]i高负载有关。 3在一定范围内，【cf+】i与钙火花波幅呈正相关：【can]i浓度变化速率与 钙火花频率呈正相关。 4实验组钙火花的释放频率变慢，可能导致L一型电压依赖性钙通道失活 不完全或失活问隔时间延长，ca2+内流增加，这样钙火花的生物效应末能 董四呈医丕主亟土主盈亚翟 发挥，钙火花对VDCs的负反馈调节作用受阻，使得【Ca2+】i呈超载状态。 这可能是高Ch血症诱发SOD的重要原因之一。 5 RyR通道释放钙火花的功能不受影响。 关键词：胆固醇；0ddi括约肌；超微结构：钙火花；激光共聚焦显微镜 Characterofcalcium of Oddiand sparI岱ofsphincter it’sefcton