过硫酸氢钾复合物粉对口蹄疫病毒杀灭效果试验.doc

过硫酸氢钾复合物粉对口蹄疫病毒杀灭效果试验摘要：以过硫酸氢钾复合物粉对口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus， FMDV）的杀灭效果进行了研究。将过硫酸氢钾复合物粉以不同比例稀释后对小白鼠、成年鼠、白兔分别进行皮下注射、灌服、斑贴试验进行消毒剂安全性试验，对病毒悬液进行了消毒剂灭活病毒效果试验。结果表明，过硫酸氢钾复合物粉1∶100倍及以上稀释对小白鼠、成年鼠及白兔安全；消毒剂100%杀灭口蹄疫病毒的最高稀释度为1∶1 200。过硫酸氢钾复合物粉对口蹄疫病毒有良好的杀灭效果。 关键词：口蹄疫病毒；过硫酸氢钾复合物粉；杀灭效果 中图分类号：S855.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）08-1877-03 口蹄疫（Foot and mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus，FMDV）所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]。注射疫苗是控制口蹄疫的有效手段，但对畜舍的定期消毒及口蹄疫疫情发生后的消毒仍是重要的工作。强碱是一种对口蹄疫病毒有良好杀灭作用的消毒剂，但这种消毒剂对人和动物有较大的毒害作用，现在已经较少使用。随着消毒剂研制方法的改进，过硫酸氢钾复合物粉逐渐受到人们的关注[2]。为观察验证其对口蹄疫病毒杀灭效果，本试验对过硫酸氢钾复合物粉的消毒作用进行了探讨，以期为有效控制口蹄疫提供理论支撑。 1 材料与方法 1.1 材料 过硫酸氢钾复合物粉（有效氯含量不低于10.0%，由甘肃临洮威特药业有限公司提供，文中简称消毒剂）。试验用病毒为O型口蹄疫乳鼠组织毒（LD50=10-8.0），由中国农业科学院兰州兽医研究所提供。试验用动物为4日龄小白鼠、成年鼠、2月龄新西兰白兔，由中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物场提供。 1.2 口蹄疫病毒悬液的制备 口蹄疫病毒悬液的制备按照参考文献[1、2]进行。将O型口蹄疫小白鼠组织毒（LD50=10-8.0）用0.04 mol/L的磷酸盐缓冲液（pH 7.6）稀释成1∶10倍病毒悬液，备用。 1.3 消毒剂安全性试验 用灭菌水将消毒剂按质量体积比（m∶V，g/mL）稀释成（1∶50、1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1 000）后分别背部皮下注射4日龄小白鼠，每个浓度试验组注射5只，每只注射0.2 mL；设阴性对照组，每只小白鼠注射0.2 mL灭菌水。注射后连续观察7 d。2次重复。 用灭菌水将消毒剂按质量体积比（m∶V，g/mL）稀释成（1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1 000）后分别灌服成年鼠，每个浓度试验组灌服5只，每只灌服0.2 mL；阴性对照组，每只成年鼠灌服0.2 mL灭菌水。灌服后观察7 d，2次重复。 用灭菌水将消毒剂按质量体积比（m∶V，g/mL）稀释成（1∶100、1∶200、1∶400），将5只白兔背部毛剪去，每个浓度试验组的消毒剂溶液1 mL均匀滴在白兔去毛皮肤表面；设阴性对照组，对照组白兔在去毛皮肤处滴1 mL灭菌水。观察7 d，2次重复。 1.4 消毒剂对口蹄疫病毒杀灭效果试验 根据安全性试验的结果，在安全浓度范围内将消毒剂做浓度梯度稀释（1∶800、1∶1 000、1∶1 200、1∶1 400、1∶1 600）后，与口蹄疫病毒悬液混匀，使病毒的终浓度达到1∶1 000，室温作用30 min后，皮下注射3日龄小白鼠。试验组每只小白鼠背部皮下注射0.2 mL；阳性对照组，每组注射0.2 mL的1∶1 000的病毒悬液；阴性对照组，每组注射0.2 mL的灭菌水。每组5只小白鼠，注射后观察7 d，重复2次。 1.5 结果判断 1.5.1 消毒剂的安全性判定 试验组小白鼠全部健活或无不良反应，判为安全，反之为不安全。 1.5.2 消毒剂对口蹄疫病毒杀灭效果的评价 阴性对照组小白鼠在观察期间无异常表现，全部健活，同时阳性对照组小白鼠在接种病毒后全部发病死亡，并从小白鼠体内检测到口蹄疫病毒，试验成立。在试验成立的情况下，试验组小白鼠在观察期间无异常表现，全部健活，判定该浓度下消毒剂有效；若试验组有小白鼠死亡，并从小白鼠体内检测到口蹄疫病毒，判定该浓度下消毒剂无效。 2 结果与分析 2.1 消毒剂的安全性试验结果 试验表明（表1、表2、表3），过硫酸氢钾复合物粉1∶100倍及以上稀释对小白鼠、成年鼠及白兔安全，并且注射部位的皮肤无炎症。 2.2 对口蹄疫病毒杀灭效果 由表4可知，消毒剂100%杀灭口蹄疫病毒的最高稀释度为1∶1 200。 3 讨论 口蹄疫病毒属于小