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微生物检测说明书1菌落总数（CFU/mL）使用仪器：高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、培养箱、电炉、天平、冰箱、菌落计数器、pH计、灭菌试管、平皿（直径9 cm）、刻度吸管等平皿计数法测定生活饮用水及其水源水中的菌落总数，水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48 h后，所得1 mL水样所含菌落的总数。）营养琼脂成分：蛋白胨?10g、牛肉膏3g、氯化钠5g 、琼脂10g～20g、蒸馏水1000mL制法：将上述成分混合后，加热溶解，调整pH为7.4～7.6，分装于玻璃容器中（如用含杂质较多的琼脂时，应先过滤），经103.43 kPa (121，15 lb)灭菌20 min，储存于冷暗处备用。检验步骤：（1）生活饮用水：以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约l5 mL已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36℃士1 ℃培养箱内培养48 h，进行菌落计数。即为水样l mL中的菌落总数。（2）水源水：以无菌操作方法吸取lmL充分混匀的水样，注入盛有9 mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:10稀释液。吸取l:l0的稀释液1 mL注入盛有9 mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1：100稀释液。按同法依次稀释成1：1000，1：10000稀释液筹备用。如此递增稀释一次，必须更换一支1mL灭菌吸管。用灭菌吸管取未稀释的水样与2个～3个适宜稀释度的水样1 mL，分别注入灭菌平皿内。以下操作同生活饮用水的检验步骤。菌落计数及报告方法：作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。不同稀释度的选择及报告方法：首先选择平均菌落数在30～300之间者进行计算，若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例1）。若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数（如表1中实例2）。若大于2则报告其中稀释度较小的菌落总数(如表1中实例3)。若等于2亦报告其中稀释度较小的菌落数（见表1中实例4）。若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例5）。若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例6）。若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例7）。若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以未检出报告之。如果所有平板上都菌落密布，不要用“多不可计”报告，而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2个平板1 中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落数，乘以皿底面积63.6 ，再乘其稀释倍数作报告。菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告，大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示（见表1“报告方式”栏）。表1 稀释皮选择及菌落总数报告方式实例?不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落敬之比?菌落总数／(CFU/mL)报告方式／( CFU/mL)1:101:1001:10001136516420—1640016 000或1.6×22760295461000或 3.8×32890271602000或 2.7×4150308215001 500或1.5×5多不可计1650?513?513000510 000或 5.1×62711?5?270270或 2.7×7多不可计30512?3050031000或3.1×2总大肠菌群（MPN/100mL或CFU/100mL）仪器：培养箱、冰箱、天平、平皿(直径为9 cm)、试管、分度吸管(l mL，10 mL)、锥形瓶、抽滤设备、滤膜（孔径0.48um）、滤器、无齿镊子总大肠菌群滤膜法是指用孔径为0. 45um的微孔滤膜过滤水样，将滤膜贴在添加乳糖的选择性培养基上37℃培养24 h，能形成特征性菌落的需氧与兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。品红亚硫酸钠培养基：成分：?蛋白胨（10g?）?，酵母浸膏（5g）?，牛