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实验一生物显微镜与构造和使用方法
实验一 生物显微镜的构造和使用方法
一、目的要求
(一)熟悉生物显微镜的构造及其功用,正确掌握显微镜的使用方法并牢记使用时的注意事项。
(二)学习低、高倍镜的镜检技术。
二、实验内容
(一)观察显微镜的各部分结构,理解其基本性能。
(二)学习使用显微镜的方法。
(三)初步认识几种类型的显微镜。
三、材料和用具
电子生物显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、牙签、 洗耳球,甲基蓝染色液、滤纸。
四、操作与观察
(一)显微镜的基本结构:
显微镜是实验室中最常用的仪器。我们要了解它的基本结构,并学会使用显微镜的方法。
显微镜的中部有一弯曲的柄,称镜臂;基部有一马蹄形部分,是镜座。自柜中取用时,用右手握紧镜臂,左手托住镜座,保持镜体直立,轻轻放置于桌上,观察各部构造。
镜座上的短柱叫镜柱。镜臂基部有一个方形或圆形的平台,是载物台(或称镜台)。台的中央有一圆孔,可通过光线。两侧有压片夹,用以固定玻片标本。现代的显微镜具镜台X-Y驱动器,用以固定和移动玻片标本。在圆孔的下面,有由一片或数片透镜所组成的聚光器,有集射光线于物体的作用。在聚光器下方有反光镜,可将光线反射至聚光器。此镜一面平,一面凹。凹面具有较强的反光性,多用于光线较暗的情况下;光线较强时用平面镜即可。电子显微镜的光源来源于内光源,位于镜座靠后方。镜座右侧臂有调节螺旋,可以前后调节改变光线的强弱。光线较强适于观察色深的物体;光线较弱适于观察透明(或无色)的物体。
在载物台的圆孔上方,有一附于镜柄上端的圆筒称为镜筒,其上下两端附有镜头。现代的显微镜一般有两个镜筒。两镜筒之间的距离,可按观察者双目的的距离调节。
镜筒上端为接目镜(或称目镜),可从镜筒内抽出。接目镜有低倍和高倍之分。
在镜筒下端有可放置的圆盘叫旋转器,下面附有2~4个接物镜(或称物镜)以螺旋旋入旋转器内。接物镜也有低倍和高倍之分。转动旋转器可换用接物镜。
在镜臂上有两组螺旋。大的叫粗调焦器,小的叫细调焦器。现代的显微镜粗、细调焦器常组合在一起,外周粗的螺旋为粗调焦器,小的叫细调焦器。用调焦器调焦点。粗调焦器升降镜筒较快,用于低倍镜调焦;细调焦器升降镜筒较慢,用于高倍镜调焦。
接物镜有低倍和高倍之分。较短的是低倍,一般放大10倍(10×);较长的是高倍,一般放大40倍(40×)、油物镜放大100倍(100×)。接目镜也有高低倍之分,较长的是低倍,一般放大5倍(5×)或6倍(6×),较短的是高倍,一般放大10倍(10×)、12倍(12×)或15倍(15×)。
显微镜的总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。例如,作用5×接目镜与10×接物镜,则总放大倍数是50倍。使用10×接目镜与40×接物镜,则总放大倍数是400倍。
(二)显微镜的使用方法
1.光线的调节:使用显微镜时,应使镜臂向着自己(现代显微镜使镜臂反向对着自己),摆好显微镜,平放在实验台上。转动粗调焦器,把镜筒向上提起。转动旋转器,使低倍接物镜对准载物台的圆孔。二者相距约2cm左右,打开光源按钮,向前向后移动按钮,两眼对着双筒接目镜观察,调节光线的强弱至适宜强度。
2.低倍镜的使用:将需观察的标本装片放在载物台上,使标本正对中央圆孔。用玻片夹固定。俯首侧视接物镜,并顺时针方向旋动粗调焦螺旋,使载物台上升到装片与接物镜约0.5厘米处。危重双眼全睁自目镜观察,并向逆时针方向慢慢地转动粗调焦螺旋,使载物台下降至能见到物像为止。为使见到的物像更清晰,再来回转动细调焦螺旋。
3.高倍镜的使用:需用高倍镜时,一定是在上述低倍镜下能看清物像的前提下进行。首先将要详细看的部分移到视野正中央,转动转换器,换高倍物镜。转动细调焦器,上下调节,使物像达到最清晰为止。
电子显微镜
(三)镜检练习
1、字母或汉字观察:取干净载玻片,在其正中用钢笔写上一个英文字母或汉字,字体越小越好,于低倍镜下观察,上下左右轻轻移动装片,观察物像与实际物像及物像移动方向如何?思考一下原因。
2、人口腔粘膜上皮细胞的观察:取一干净的载玻片,放一滴清水,用消毒的牙签从口腔颊部轻轻地刮取一点粘膜物,置于载玻片的水中混匀,再将盖玻片一边与水外缘相接,然后将盖玻片以45°倾斜角匀速放下,制成涂片标本。依次进行低、高倍镜镜检。
(四)便用显微镜的注意事项
1、加强责任心,养成爱护仪器的习惯,严格操作规程。
2、取放显微镜时必须一手握镜臂,另—手托住镜座,禁止单手提着行走。
3、禁止拆散显微镜上任何部件。
4、镜检时力求坐姿端正、自然、舒适,双目同时睁开观察,这样即利于绘图,又可减少
眼睛疲劳。
5、每次镜检,不论物体大小,其顺序必须是先低倍后高倍,最后用油浸镜。
6、低倍镜检时必须一边俯侧观察载物台上升一边转动粗调螺旋,然后
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