河北省唐山市开滦第二中学高中生物-5.3-血红蛋白的提取与分离导学案-新人教版选修1.docVIP

河北省唐山市开滦第二中学高中生物 5.3 血红蛋白的提取与分离导学案 新人教版选修1 班级： 姓名： 小组： 【学习目标】 1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白 2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理 【重点难点】 重点： 1. 凝胶色谱法的原理和方法 难点： 1. 样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填 【自主学习】 蛋白质的物化理性质： 的形状、大小，所带电荷 、溶解度、 、亲和力等千差万别，由此 和 各种蛋白质。 1．1凝胶色谱法（分配色谱法）： （1）原理：（见课件图） 分子量大的分子通过 的间隙，路程 ，流动 ；分子量小的分子穿过 内部，路程 ，流动 。 （2）凝胶材料：多孔性， ，如葡聚糖、琼脂糖。 （3）分离过程： 混合物上柱→ →大分子 、小分子 →收集 →收集 。 ＊洗脱：从色谱柱 不断注入 ，促使 的差速流动。 1．2缓冲溶液 （1）原理：由 和 组成（如 ， ， 等），调节 的用量，可配制不同pH的缓冲液。 （2）缓冲液作用：抵制外界 对溶液pH的干扰而保持 。 1．3凝胶电泳法： （1）原理：不同蛋白质的 不同，在电场中受到的作用力 、 、 不同，导致 在电场中的运动方向和运动速度不同。 （2）分离方法： 、 等。 （3）分离过程：在一定pH下，使 带上正电或负电；加入 的SDS，形成“ ”，使蛋白质迁移速率仅取决于 。 [ 【问题生成】 同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑，请把问题填写在下面 【师生互动、问题探讨】 1蛋白质的提取和分离一般分为哪些基本步骤？ 样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。 思考：是否所有种类的蛋白质的提取和分离都是这样的？为什么？ 不是。因为蛋白质的来源和性质不同，分离方法差别很大。 2选择实验材料 （1）你认为鸟类血液和哺乳动物血液中，最好哪种血液来提取血红蛋白？为什么？ 哺乳动物血液。因为该细胞中没有细胞核，血红蛋白含量高。 （2）请阅读投影资料，认识哺乳动物血液组成及血红蛋白性质。并思考回答下列问题： 血液由 和 两部分组成。 血细胞中 细胞数量最多，细胞的含量最高的化合物是 。 该化合物是由 和 构成的，其中每个亚基中都含有一个能与O2和CO2结合的 基团。 【课堂小结与反思】 决定运动方向 形成库仑力 形成阻力 决定运动速率 电荷性质 √ 电荷量 √ √ 分子形状 √ √ 分子大小 √ √ 【自我检测】 一．选择题 1. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（ ） A. 对其他分子的亲和力 B. 溶解度 C. 所带电荷多少 D. 相对分子质量的大小 2. 凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是（ ） A. 糖类化合物 B. 脂质 C. 蛋白质 D. 核酸 3. 选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料，有何好处（ ） A. 血红蛋白是有色蛋白 B. 红细胞无细胞核 C. 红细胞蛋白质含量高 D. 红细胞DNA含量高 4. 将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第二层是（ ） A. 甲苯 B. 血红蛋白水溶液 C. 脂溶性物质的沉淀层 D. 其他杂质的沉淀