嗜乙酰乙酸棒杆菌corynebacteriumacetoacidophilum-δldh缺氧.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 杨倩 等/ 嗜乙酰乙酸棒杆菌Corynebacterium acetoacidophilum-Δldh 缺氧条件下代谢葡萄糖途径的变化 435 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn March 25, 2014, 30(3): 435−444 DOI: 10.13345/j.cjb.130394 ©2014 Chin J Biotech, All rights reserved 工业生物技术 嗜乙酰乙酸棒杆菌Corynebacterium acetoacidophilum- Δldh 缺氧条件下代谢葡萄糖途径的变化 杨倩，郑璞，于芳，刘伟，孙志浩 江南大学生物工程学院 教育部工业生物技术重点实验室，江苏 无锡 214122 杨倩, 郑璞, 于芳, 等. 嗜乙酰乙酸棒杆菌 Corynebacterium acetoacidophilum-Δldh 缺氧条件下代谢葡萄糖途径的变化. 生物工程学报, 2014, 30(3): 435−444. Yang Q, Zheng P, Yu F, et al. Metabolic shift of Corynebacterium acetoacidophilum-Δldh under oxygen deprivation conditions. Chin J Biotech, 2014, 30(3): 435−444. 摘 要: 缺氧条件下嗜乙酰乙酸棒杆菌 Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870 生长停滞，却能够代谢 葡萄糖产生以乳酸和琥珀酸为主的有机酸。采用以sacB 基因为反向筛选标记的同源重组染色体基因敲除系统， 敲除嗜乙酰乙酸棒杆菌的乳酸脱氢酶基因，得到的Δldh 菌株CCTCC NO. 在缺氧条件下不产乳酸， 葡萄糖消耗速率降低了29.3% ，产琥珀酸和乙酸浓度分别提高45.6%和 182%；NADH/NAD+值小于 1 (约0.7) ； 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和乙酸激酶的比酶活分别提高 84%和 12 倍。说明嗜乙酰乙酸棒杆菌中乳酸合成途径 的阻断驱使了琥珀酸和乙酸代谢途径加强，推测加强 NADH 供给和阻断乙酸产生支路可能是提高 C. acetoacidophilum 菌株产琥珀酸产量的有效途径。 关键词: 嗜乙酰乙酸棒杆菌，ldhA-敲除菌，缺氧，琥珀酸，代谢途径 Metabolic shift of Corynebacterium acetoacidophilum-Δldh under oxygen deprivation conditions Qian Yang, Pu Zheng, Fang Yu, Wei Liu, and Zhihao Sun Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University , Wuxi 214122, Jiangsu , China Abstract: Lactate and succinate were produced by Corynebacterium acetoacidophilum from glucose under oxygen Received: July 30, 2013; Accepted: September 16, 2013 Supported by: National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2006AA020301-012). Corresponding author: Pu Zheng. Tel: +86-510 E-mail: zhengpu@ 国家