第五章-受精的.docVIP

第五章 受精 受精是单倍体的精子和卵子相互结合和融合而形成双倍体合子的过程，是有性生殖生物个体发育的起点。它一方面保证了双亲的遗传作用，另一方面恢复了染色体双倍体数目。同时受精可以把个体发生过程中产生的变异通过生殖细胞遗传下去，保证了物种的多样性，在生物进化上具有重要意义。 第一节 受精研究历史的简单回顾 1875年和1876年，Hertwig和Fol分别在各自独立的研究中首先在海胆中发现了受精现象。Hertwig发现了海胆精子入卵后雌雄两原核融合的现象，而Fol发现了精子接近和穿入卵子以及受精膜形成的过程，至此结束了胚胎学上的“精源学说”和“卵源学说”。1883年，van Beneden发表了马副蛔虫受精的细胞生物学研究论文，肯定了在遗传上父母贡献均等的理论，并使精卵作用的研究更为深入。他在马副蛔虫受精卵的第一次有丝分裂纺锤体上看到四条染色体，其中两条来自父方，两条来自母方，提出父母的染色体通过精卵的融合传给子代。此后，H.T. Boveri在马副蛔虫的研究工作进一步巩固了上述理论，把染色体看作是遗传信息的载体。 二十世纪以来，有关受精的研究转向探讨受精后生理学变化和两性配子结合的机制。在早期的研究中发现受精后细胞膜通透性变化、耗氧量增加等现象。1912年以后，F.R. Lillie根据在沙蚕和海胆获得的一系列研究结果，提出了精卵相互作用的受精素假说。根据这一假说，卵子分泌称为受精素（fertilin）的物质，使精子运动能力加强，并向卵子聚集。 四十年代前后，A. Tyler 就受精素的生物学、化学和免疫学特征展开了一系列工作，并进一步强调卵子在成熟过程中分泌的物质对受精有重要意义。与此同时，M. Hartmann在海胆的研究工作中证实，不仅卵子能分泌受精素（雌配素），精子也能排出抗受精素（雄配素），二者相互作用的程度决定着受精的成功与否。不久以后，在两栖类上发现卵外胶膜在精卵相互作用中发挥重要功能，为两栖类受精所必需。 与海胆和两栖类相比，哺乳动物的受精研究工作起步较晚，一个主要的原因是哺乳动物受精发生在体内，不易进行研究，并且很难得到大量卵子。十九世纪末到二十世纪中叶，很多人进行过哺乳动物体外受精的实验，并且多位学者声称获得成功。尽管不能排除有少数报道是正确的，但根据目前判断受精发生的知识，例如精子入卵、第二极体排放等标准，其中绝大部分实验可能不是真正实现了体外受精。原因在于很多早期进行哺乳动物体外受精研究的人员采用的是未成熟的卵母细胞。有的学者意识到了这个问题，授精前把卵巢中的卵母细胞培养一段时间。例如，Rock和Menkin于1944年就在进行体外授精前把人卵巢卵母细胞预先进行了培养，但由于培养时间太短而没有成功。先前判断体外受精成功的标准是看卵子是否卵裂，而当时还不清楚哺乳动物卵子在体外培养时很容易发生孤雌活化和碎裂（fragmentation）。此外，当时很少有人在37?C下进行体外授精，而多数是在较低的温度下进行。 哺乳动物的体外受精研究真正发展是在Austin和美籍华人张明觉于1951年发现精子获能（capacitation）现象以后。两位科学家几乎同时在大鼠和兔中发现，精子必须在雌性生殖道内滞留一段时间才能获得受精的能力。这一发现导致二十世纪五十年代和六十年代体外受精研究的黄金时期的到来。从精子获能现象发现后大约二十年，即七十年代初开始，人们实现了哺乳动物精子的体外获能，使哺乳动物的体外受精更易操作和方便（精子获能详细介绍见章）。1978年，Steptone和Edwards利用体外受精技术成功地获得第一例试管婴儿，使体外受精成为造福于人类的技术。此后，发展了单精受精技术，使少精症和无精症患者可以得到后代。到目前，全世界大约有一百万不育夫妇通过体外受精技术获得了后代，并且体外受精也已应用于畜牧业生产当中。此外，各种动物体外受精技术的建立，便利了哺乳动物受精的基础研究。 第二节 受精的概述 一、受精的基本过程 受精涉及到精卵之间多步骤、多成分的相互作用。就哺乳动物而言，受精发生前精子穿过卵丘细胞后首先与卵子周围的透明带(zona pellucida, ZP)识别和结合(图5-1)。这种精子与卵子ZP之间的初级作用诱发精子头部顶体内容物发生胞吐，这一过程称为顶体反应(acrosome reaction, AR)。顶体反应后的精子与ZP发生次级识别和结合，顶体反应释放的水解酶与精子本身运动协同作用，使精子穿过透明带（图5-2）。精子穿过透明带而到达卵周隙后，精子头部赤道段的质膜又与卵质膜发生结合和融合，精子进入卵子（图5-3）。受精中精卵相互作用的步骤和过程见图5-4。哺乳动物卵子受精前一般停滞在第二次减数分裂的中期（MII期）。精子入卵后，激发卵子使其恢复减数分裂，并释放第二极体。第二次减数分裂器所处的部位的