高中生物-专题2课题1微生物的实验室培养课件5-新人教版选修1.pptVIP

煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂（70%酒精等） 紫外线 针对不耐高温的液体 接种室、超净工作台 能耐高温的，需要保持干燥的物品 灼烧法 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 接种工具（接种环等） 吸管 实验操作者的双手 培养皿等玻璃器皿 培养基 1、消毒方法 2、灭菌方法 干热灭菌 本实验目的：用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养 阶段1：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 阶段2：纯化大肠杆菌 三、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL ①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一 起加热? 可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于 水中，减少误差。 1．计算 2.称量 3．溶化 ②加琼脂的目的是什么? 仅作为凝固剂 4、调pH 5、分装 6．灭菌： 将培养基转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅。 将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 ③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么？ 在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞， 在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中 杂菌污染的作用。 ④培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ 不能，因为培养皿要保持干燥，应该用 干热灭菌。 7、倒平板 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以避免培养基表面的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 稀释涂布平板法 将接种的培养基和未接种的培养基都放在37度恒温箱，培养12h和24h,观察并记录结果。 菌种的保存 1.临时保藏： 接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2.长期保存： 甘油冷冻管藏法 实验报告目录 1.引言 (实验原理，实验背景，相关研究) 2.材料与方法 2.1 实验试剂及材料 （产地，价格，型号，规格） 2.2 重要仪器 2.3 方法 （具体实验参数） 2.3.1 xxxxxx 2.3.2 xxxxxx 3.结果与分析 （成功或失败的原因分析） 3.1 xxxxxx 3.2 xxxxxx 4.结论和创新点 5.继续研究计划 6.参考文献: 致谢 答辩PPT参考模板 四川省成都市第七中学 XXX XXX 环境因素对XXX的影响 一、研究背景 二、设计思路