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人类β1,3半乳糖基转移酶7对人4IgB7H3修饰作用浅谈
人类β1,3半乳糖基转移酶7对人4IgB7H3修饰作用浅谈
作者:唐春花, 马震宇, 岳爱环, 行书丽,蒋俊华 张昊 曹静媛, 周迎会,吴士良
【摘要】 目的: 探讨人4IgB7H3基因转染人胃癌细胞株SGC7901后人类β1,3半乳糖基转移酶7(β1,3galactosyltransferase 7,β3GalT7)的表达变化,以期发现4IgB7H3与β3GalT7的相互关系。方法: 脂质体介导重组逆转录病毒载体pEGZTerm/4IgB7H3转染SGC7901细胞,筛选获得稳定表达4IgB7H3的亚克隆细胞株,通过RTPCR和蛋白质印迹方法检测β3GalT7的表达。结果: 成功获得稳定表达4IgB7H3的亚克隆细胞株SGC7901/4IgB7H3;β3GalT7随4IgB7H3的表达上调而上调。结论: 4IgB7H3蛋白的修饰成熟可能需要β3GalT7的作用。
【关键词】 4IgB7H3; β1,3半乳糖基转移酶7; SGC7901; 转染
[Abstract] Objective: We researched the change of UDPGal:betaGlcNAc beta 1,3galactosyltransferase polypeptide 7 expression in SGC7901/4IgB7H3 cell to find the relation between 4IgB7H3 and β3GalT7. Methods: Transfered pEGZTerm/4IgB7H3 into SGC7901 cell, then detected the expression of UDPGal:betaGlcNAc beta 1,3galactosyltransferase polypeptide 7 with RTPCR and Westernblotting. Results: SGC7901/4IgB7H3 cell line were successfully obtained. The expression of β3GalT7 was upregulated follow the upregulation of 4IgB7H3 on mRNA and protein level. Conclusion: UDPGal:betaGlcNAc beta 1,3galactosyltransferase polypeptide 7 may modify 4IgB7H3 protein.
[Key words] 4IgB7H3; β1,3galactosyltransferase 7; SGC7901; transfer
共刺激分子(costimulatory molecules)B7H3最早报道于2001年,由Dong等[1]从人类树突状细胞来源的cDNA文库克隆而来,为新近发现的B7家族的成员。该基因位于人15号染色体上,由7个外显子和6个内含子组成,为I型跨膜糖蛋白,相对分子质量为45~110 kDa,编码361~534个氨基酸,属Ig家族。其蛋白包括N端信号肽,IgV样区、IgC样区、跨膜区和一个45个氨基酸的胞质尾[2]。
由于mRNA的剪接方式不同,B7H3有2IgB7H3和4IgB7H3两种剪接体,研究发现人的组织主要表达4IgB7H3,部分组织也表达2IgB7H3,而小鼠则只有2IgB7H3[2]。B7H3 mRNA在人类组织中广泛表达,在多种正常和肿瘤组织中均有表达[3]。在非淋巴样组织,如心、肝、肺、胎盘、前列腺、胰腺、小肠、结肠中高表达,在脑、骨骼肌、肾等组织中表达较低,许多淋巴组织如脾、淋巴结、骨髓、胸腺、胎肝中也有表达。B7H3 mRNA在一些肿瘤细胞系如黑色素瘤细胞系G361、宫颈癌细胞系HelaS3、白血病细胞系K562中有表达,在胃癌和胃腺瘤细胞膜、细胞质中均可见B7H3阳性表达。但外周血白细胞未见其表达,经过IFNγ刺激的DC和经过GMCSF刺激的单核细胞上可诱导B7H3的表达[4]。近年来越来越多的研究表明,共刺激分子的调节性表达、相互作用及其信号传递在非常复杂的肿瘤免疫应答过程中起着极其重要的作用。B7家族是最具有代表性的共刺激分子,作为惟一能从抗原递呈细胞(APC)单向传递信号至T细胞的共刺激分子,B7家族成员在肿瘤中的作用引起学者的普遍关注。
人类β1,3半乳糖基转移酶7(β1,3galactosyltransferase 7,β3GalT7)是利用TBLASTN信息途径,以信息探针β3GalT1(基因库登入
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