应用PCR-RFLP分析结核分枝杆菌rpsL基因突变.PDF

·8 · 中国防痨杂志2000 年第 22 卷第 1 期 应用 PCR - RFLP 分析结核分枝杆菌 rpsL 基因突变 吴雪琼 　张俊仙 　庄玉辉 ( ) 摘要 　目的 　了解结核分枝杆菌链霉素 SM 耐药基因突变情况 ,建立快速检测耐药突变株的方法。 方法 　通过 PCR - RFL P 分析 62 株结核分枝杆菌临床分离株的 rpsL 基因突变的部位和性质。结果 　以 ( ) H37 RV 标准株为对照 ,13 株敏感株的 rpsL 基因有 Mbo Ⅱ酶切位点;37 株耐 SM 分离株中 ,31 株 838 % 无 Mbo Ⅱ酶切位点;12 株耐其它抗结核药物株中 ,也有 2 株无 Mbo Ⅱ酶切位点。结论 　大多数结核分枝杆菌 ( ) SM 耐药分离株的核糖体 S12 蛋白编码基因 rpsL 第 43 位密码子有点突变。PCR - RFL P 可能成为快速 检测结核分枝杆菌耐药突变株的一种新方法。 关键词 　分枝杆菌 ,结核 　药物耐受性 　聚合酶链反应 　限制性片段长度多态性 Analyzing the mutations of rpsL gene in Mycobacterium tuberculosis clinical isolates by PCR - RFLP W U X ue qiong , ZHA N G J unxian , ZHUA N G Y uhui. Tuberculosis Research L aboratory , The 309 th Hospital , Beijin g 100091. Abstract Objective 　To observe the mutations of rpsL gene in M. tuberculosis streptomycin - resistant iso lates ,and to develop a new method for detecting drug resistance. Method 　Analyzing the mutations of rpsL gene codon 43 in M. tuberculosis clinical isolates with PCR - RFL P. Results 　M. tuberculosis strain H R was used as 37 V a control. The rpsL gene fragments from 13 drug - sensitive strains could be digested by restriction endonuclease ( ) Mbo Ⅱ. 31 83. 8 % of 37 streptomycin resistant strains were not restricted by Mb