微量分光光度计详解.ppt

NanoDrop 2000超微量分光光度计 内容简介 一. NanoDrop 2000超微量分光光度计 (1)仪器描述及规格 (2)检测原理及优点 二.软件 (1)使用前准备工作及软件操作界面介绍 三.应用 仪器类型： 分光光度计 最小样品量： 0.5ul 波长： 1mm（可以自动调整到0.05mm） 光源： 氙闪烁灯 检测器类型： 2048—象素线型硅CCD阵列 波长范围： 190－840nm 波长准确性： ±1 nm 光谱分辨率： ≤1.8nm 吸收光精确性： 0.002吸光值（1mm光程） 吸收光准确性： ±2％（257nm波长下，0.76个吸光值） 吸光值范围： 0.02—300（等同于10mm光程时） 检测极限： 2ng/ul dsDNA 最大检测浓度： 15,000ng/ul（dsDNA） 检测时间： 5秒 仪器占地面积; 14cm×20cm 重量： 2kg 样本基座材料： 303不锈钢以及石英光纤 工作电压; 12V 工作功率; 12－18W（最大30W） 软件兼容性; Windows XP 和Vista（32bit (2)检测原理 利用表面张力保持样本形态的专利技术进行检测。只需使用加样器将1ul的样品直接加在检测表面上，而无需其他容器或检测装置。使用两根光纤将样本拉开，形成固定光程的检测通路，自动进行检测。 优点 1.检测所需样微量，0.5-2ul，可以节省辛苦得到的样品 2.检测范围宽，比传统的分光光度计的上限高200倍，吸光度0.02-300，对于多数样品而言，无需稀释 3.无需检测容器，日常消耗低，直接将样品加在检测面上，检测完以后把检测表面擦干净即可，保证样品间无交叉污染，也不干扰后续检测 4.全波长190-840nm，分辨率1nm，对于任何一个样品的测量，仪器都自动给出全波长的扫描结果190-840nm 5.使用方便快速，1个样品只需5秒 6.无需预热，直接测量 核酸浓度检测 1． 在主菜单中选择核酸模式，如果显示波长校准窗口，放 下基座臂点击OK。 2． 选择检测的样品类型，默认的设定为DNA-50。 3． 选择浓度单位，默认的为ng/ul。 4． 默认的校准波长为340nm，重新选择一个校准波长或者 去选择Baseline来不选择校准波长。 5． 选择Add to Report自动把检测结果添加到当前报告中 去，默认设置是把每个样品都添加到报告中。要把样 品数据保存到工作薄中，在检测前必须选上Add to report。 6．选择Overlay spectra可以在同一时间显示多个光谱。 7．使用合适的液体建立空白对照，空白对照液体是溶解目标分子的液体。空白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。 注意： 1.每次检测的样品都必须是新加的。 2.使用干净的无尘纸擦干净上下基座，这样仪器就可以进行下一个样品检测了。 Oligo Calc 用来计算特定核酸序列的分子量，消光系数，浓度因子 要使用Oligo Calc： 1.使用如下方法来输入一个碱基序列： ?? 使用碱基序列显示框下的按键。键盘（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）复制和粘贴一个序列到显示框（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）清除碱基序列框中的序列，点击序列框右侧的Clear键，单个可以手动来删除。 2.选择磷酸化程度，可以选择：DNA单磷酸化，RNA单磷酸化和三磷酸化。 3.如果需要可以选择双链，互补的双链序列能够包括在计算中。 4.在下拉框中，选择检测的核酸类型，默认的为DNA。 5.如果要添加序列选择Modification并输入相关的分子量。 thanks * * NanoDrop 2000分光光度计可以检测0.5-2ul 的样本，而且检测是非常高的准确性和重复性。样本保留系统