参参康心胶囊对小鼠心肌缺血线粒体膜SOD、MDA影响.docVIP

参参康心胶囊对小鼠心肌缺血线粒体膜SOD、MDA影响 　 作者：兰云 明海霞 刘喜平 李沛清 廖湘琦 【摘要】 目的：观察参参康心胶囊对缺血小鼠心肌线粒体丙二醛、超氧化物歧化酶的 影响 。 方法 ：腹腔注射垂体后叶素（Pit）造成小鼠心肌缺血损伤为模型，测定心肌线粒体膜超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果：模型组与空白对照组相比，MDA明显升高（plt;0.01），参参康心胶囊大、中、小三剂量组与模型组比较MDA含量明显下降，有显著性差异，但无明显的剂量-效应关系。模型组心肌细胞线粒体SOD活力略有下降，但不明显，而参参康心胶囊大剂量组SOD活力有显著增高，而中小剂量不明显。结论：参参康心胶囊保护缺血心肌细胞线粒体损伤的机理可能与升高线粒体SOD活性、降低MDA含量有关。 论文代写 【关键词】 参参康心胶囊 心肌缺血 线粒体 丙二醛 超氧化物歧化酶 论文代写 氧自由基是造成心肌缺血的重要因素之一。细胞内丰富的线粒体对氧自由基损伤十分敏感[1、2]，所以通过对线粒体的代谢、结构及功能变化的 研究 ，既可以了解心肌缺血性损伤的机制，又可以了解药物的 治疗 效果。新药参参康心胶囊来源于名老中医验方，由人参等三味药物组成，经 现代 制药工艺加工而成，临床 应用 多年，对冠心病、心肌梗死等心肌缺血性疾病有显著疗效。为了近一步明确该方抗心肌缺血损伤的作用机制，我们观察了该药对缺血心肌线粒体膜氧自由基及脂质过氧化的影响，以期进一步了解该制剂对改善心肌缺血的作用机制，为临床治疗心肌缺血性疾病提供可靠的 理论 依据。 1 材料 论文代写 1.1 实验动物 昆明种普通级健康小鼠，雌雄各半，体重30.0±2.0g，由兰州大学医学实验中心提供。动物合格证号：医动字第14—005。 毕业论文 1.2 实验药物 参参康心胶囊：①处方由人参等三味药物按一定的比例组成。由兰州佛慈制药股份有限公司制备，兰州中药现代化工程技术中心监制。规格为0.5g·粒-1(每粒相当于生药1g)，实验时用生理盐水溶解为120mg生药/ml。②地奥心血康胶囊：成都地奥制药集团有限公司，批号：0503079 代号022，国药准字：③垂体后叶素：上海第一生化药业公司，上海生物化学制药厂，批号：041031。 1.3 主要试剂 ①丙二醛（MDA）测定试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号②超氧化物歧化酶（SOD）测试盒，南京建成生物工程研究所，批号 论文代写 1.4 主要仪器 电子 天平（Sartorius BL150，北京赛多利斯仪器系统有限公司）；离心机（D-37520 ,德国 ）；数显恒温水浴锅（HH-4，郑州杜甫仪器厂 ）；紫外分光光度计（UV-9100，北京瑞利 分析 仪器公司）。 毕业论文 2 方法 论文代写 2.1 分组及小鼠心肌缺血模型的建立 昆明种普通级健康小鼠，60只，体重30.0±2.0g，（兰州大学医学实验中心提供）。将动物随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组（地奥心血康组）、参参康心胶囊小剂量组、参参康心胶囊中剂量组、参参康心胶囊大剂量组共六组，每组10只。参参康心胶囊低剂量组(1.5g生药/kg)、中剂量组(3g生药/kg)、大剂量组 (6g生药/kg)用参参康心胶囊溶液分别按0.25ml/次、0.5ml/次、1ml/次灌胃；阳性对照组按成人常规剂量折算后给药即（0.076g/kg），1ml/次灌胃；空白对照组与模型组每日给予1ml生理盐水, 各组每天灌胃2次，连续一周。 参考 文献 方法[2]，模型组、阳性对照组（地奥心血康组）、参参康心胶囊小剂量组、参参康心胶囊中剂量组、参参康心胶囊大剂量组于末次给药30min后，腹腔注射垂体后叶素（Pit）30u/kg。 论文代写 2.2 小鼠心肌细胞线粒体的分离、提取 参考文献方法[3]，注射Pit15min后，将小鼠处死，立即摘取心脏，在冰冷的（4℃）磷酸缓冲液中洗去血液，滤纸拭干，称重； 取心脏用眼科小剪刀尽快剪碎，倒入玻璃匀浆管中，加入9倍于心脏重的冰冷匀浆介质，将玻璃匀浆管插入盛有冰水混合物的容器中匀浆； 将制备好的匀浆移入2ml离心管，用低温低速离心机以2000r/min离心10分钟，弃沉淀； 取上清液用低温高速离心机以10000r/min，4℃条件下离心15分钟，弃上清，沉淀物即为线粒体。将分离的线粒体用20倍的冰冷匀浆介质制备成混悬液，在0～4℃储存待测。 论文代写 　 2.3 参参康心胶囊对垂体后叶素模型小鼠心肌细胞线粒体超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量的 影响 论文代写 取各组线粒体混悬液，采用硫代巴比妥酸法[３]