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反式头孢丙烯酶法合成及其体外抗菌活性 　 作者：冯胜昔 梁世中 龟山丰 【关键词】 ,反式头孢丙烯；,,酶法合成；,,7 　　摘要： 以7苯乙酰氨基3E丙烯基3头孢菌素4羧酸(反式GPRA)为原料，在青霉素酰化酶作用下，首先酶法水解得到3E丙烯基3头孢菌素4羧酸(反式APRA)，过滤固相酶，滤液调pH分离得到反式APRA固体；在青霉素酰化酶作用下，反式APRA再与对羟基苯甘氨酸乙二醇酯缩合，得到反式头孢丙烯；酶法合成所得的产品与进口反式头孢丙烯对照品一致。初步体外抗菌试验表明，反式头孢丙烯对金葡菌和大肠埃希菌的体外抗菌活性比临床用头孢丙烯(顺式900%，反式9%)弱。 　　关键词： 反式头孢丙烯； 酶法合成； 7苯乙酰氨基3E丙烯基3头孢菌素4羧酸(反式GPRA)； 7氨基3E丙烯基3头孢菌素4羧酸(反式APRA)； 青霉素酰化酶(IPA750)； 抗菌活性 　　Enzymatic synthesis and in vitro antibacterial activity of transcefprozil 　　ABSTRACT Immobilized penicillin acylase (from E.coli) was used to catalyze 7phenylacetamido3Epropenylcephalosporanic acid (transGPRA) hydrolyzation into 7amino3Epropenylcephalosporanic acid (transAPRA). Then, transAPRA was acylated with hydroxyethyl ester of 4hydroxyDphenylglycine (HPGHE) to obtain transcefprozil. The activities of transcefprozil and cefprozil (cis 90%, trans 9%) against Staphylococcus aureus and Escherichia coli were tested. Transcefprozil showed less activity than cefprozil. 　　KEY WORDS Transcefprozil enzymatic synthesis; Penicillin G acylase; 7Phenylacetamido3Epropenylcephalosporanic acid (transGPRA); 7amino3Epropenylcephalosporanic acid (transAPRA); Antibacterial activity 　　头孢丙烯(cefprozil，曾称头孢罗齐)是BristolMyers公司研究开发的非酯型口服头孢菌素［1］，1992年以Cefzil的商品名在美国首次上市，是美国FDA批准的第一个可用于治疗儿童中耳炎和鼻窦炎的口服头孢菌素类抗生素，杀菌机制是阻碍细菌细胞壁合成，安全性好，不良反应极低。头孢丙烯具备以下几个特点：①属第二代头孢菌素类抗生素， 抗菌谱广并较均衡，抗菌活性强，对β内酰胺酶具有较好的稳定性；②吸收迅速，生物利用度高达94%；③治疗呼吸道感染和皮肤软组织感染疗效均达90%以上；④每日仅需口服1～2次，方便；⑤药物吸收不受食物的影响。头孢丙烯已收载在美国药典中，为美国临床医生推荐的品种之一。由于头孢丙烯C3位连接的是丙烯基，故该化合物存在两个几何异构体，一个为顺式头孢丙烯，一个为反式头孢丙烯，临床上使用的是混合体，美国药典［2］明确规定临床用的头孢丙烯， 顺式含量89%～94%，反式含量为6%～11%，测定方法为外标法。文献［3］报道顺式头孢丙烯的抗菌活性，对金葡菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等有效。Natto等［4］报道，以7氨基3氯甲基3头孢菌素4羧酸二苯甲酯为起始原料，通过缩合、碘代、Wittig反应、断保护基等步骤得到头孢丙烯。Usher等［5］以7氨基3丙烯基3头孢菌素4羧酸为起始原料，在青酶素酰化酶的作用下，与对羟基苯甘氨酸乙二醇酯缩合，得到头孢丙烯［5］。本文报道以7苯乙酰氨基3E丙烯基3头孢菌素4羧酸(反式GPRA)为原料，在青霉素酰化酶作用下，首先酶法水解得到3E丙烯基3头孢菌素4羧酸(反式APRA)，过滤固相酶，滤液调pH分离得到反式APRA固体；然后，反式APRA与对羟基苯甘氨酸乙二醇酯，在青霉素酰化酶作用下，缩合得到反式头孢丙烯，反应过程如图1所示，所得的产品与进口反式头孢丙烯对照品一致； 并对反式头孢丙烯进行初步抗菌试验研究。 　　图1 反式头孢丙烯的酶法合成（略） 　　1 实验部分 　　1.1